Хламидии посев с чувствительностью к антибиотикам

Добавлено: 03.06.2018, 21:35 / Просмотров: 45242
Закрыть ... [X]

Скачать шпаргалку [87,8 Кб]   Информация о работе

24 Классификация антител. Принцип деления антител на классы. Антитела (иммуноглобулины) – это белковые структуры, которые вырабатываюся в ответ на антигены. Иммуноглобулины синтезируются плазаматическими клетками. Состоят из тяжелых и легких полипептидных цепей, соединенных дисульфидными связями. (рис). Последовательность аминокислот в Fc-фрагменте всегда постоянна, а Fab-фрагменте – вариабельна. Паратоп – вариабельный домен Fab-фрагмента. С помощью паратопов иммуног

лобулины реагируют с эпитопами антигенов. По последовательности а/к в Fc-фрагменте различают 5 классов иммуноглобулинов: 1 – IgG – имеет 2 активных центра; отвечает за вторичный иммунный ответ; обладает антимикробным, антитоксическим, опсони-зирующим действием; активирует компле-мент по классическому пути; участвует в кожных аллергических реакциях; может прикрепляться к белкам А и М; проходит через плаценту. 2 – IgM – имеет 10 активных центра, но в реакцию вступает только 5. Об

ладает антимикробным и антитоксическим действием, выражена агглютинация и лизис, отвечает за первичный иммунный ответ, не проходит через плаценту. 3 – IgA – делят на сывороточные и секреторные (sIgA). Секреторный Ig – является димером, в котором находится секреторный компонент. Он придает устойчивость и соединен J-цепью (join). sIgA находятся на всех слизистых оболочках и препятствуют адгезии вируса, осуществляют местный иммунитет. Некоторые бактерии имеют фермент sIgA-протеазу, ко

торый расщепляет IgA. Также IgA усиливает действие лизоцима и комплемента и обладает противовирусным действием. 4 – IgE – участвуют в аллергических реакциях немедленного типа (реагины). Обладают способностью прикрепляться к тучным клеткам и базофилам, на поверхности которых идет образование комплекса АГ+АТ. 5 – IgD – увеличивается количество при кожных заболеваниях. На поверхности В-лимфоцитов находятся IgD и IgM в мономерной форме.

29 Принципы профилактики инфекционной заболеваемости. Вакцины – содержат: убитых микробов, живых ослабленных микробов, отдельные фрагменты микроба (протективный антиген), продукты жизнедеятельности. Вакцины создают активный иммунитет: 1 – Антитоксический – против экзотоксина – вводят анатоксин – обезвреженный экзотоксин, сохранивший антигенные свойства (столбнячный анатоксин). 2 – Антимикробный – против антигенов – вводят убитые микробы (стафилококковая, холер

ная, дизентерийная, гриппозная вакцины), живые ослабленные микробы (БЦЖ, вакцина против холеры, бешенства, гриппа) или фрагменты микробов. Также существуют субклеточные (химические) вакцины – это вакцина против менингита (содержит капсульные полисахариды серотипов А и С), брюшнотифозная вакцина – комбинированная вакцина, кот содержит стобнячный анатоксин и протективные антигены, гриппозная вакцина – содержит антигены Н и N. Комбинированные вакцины – могут сочетать цель

ную бактериальную клетку, фрагменты клеток и анатоксин (брюшнотифозная вакцина, АКДС – адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столб нячная вакцина). Генно-инженерные вакцины (например вакцина против гепатита В). Эубиотики – биопрепараты, которые получают из резидентов человека и используют дляповышения активности иммунитета или при дисбактериозах (колибактерин, бификол, лактобактерии). Сыворотки – содержат готовые антитела и создают пассивный иммунитет: 1 – Для лечения и

профилактики используют антитоксические сыворотки (прготивостолбнячная, против дифтерии, против бруцеллеза). Лошадь дробно гипериммунизируют анатоксином. 2 – Диагностические сыворотки – используют для диагностики: люминисцентная сыворотка для экспресс-метода, гемолитическая сыворотка, агглютинирующая сыворотка, преципитирующая сыворотка.

27 Теории иммуногенеза. Теории: 1 – Теория боковых цепей Эрлиха – клетки органов и тканей имеют на поверхности рецепторы, способные в силу химического сродства связывать антиген. Взамен связанных рецепторов клетка вырабатывает новые рецепторы. Избыток их поступает в кровь и обеспечивает иммунитет к антигену. 2 – Теория фагоцитоза Мечникова. 3 – Инструктивная теория – антитела формируют ся в присутствии антигена, т.е являются матрицей на которой штампуется молекула антитела. 4 – Селекционная

теория Бернета – лимфоидная ткань состоит из огромного числа клонов клеток, специализировавшихся на выработке антител. Попавший антиген вызывает активацию своего клона лимфоцитов, который размножается и начинает вырабатывать специфические антитела. 5 – Генетическая теория Тонегавы - За синтез Fc-фрагмента отвечает С-ген. За синтез вариабельного фрагмента отвечает V-ген (около 200), D-ген (около 80) и J-ген (около 5). В процессе созревания иммунокомпетентных клеток идет рекомбинация этих генов,

поэтому последовательность аминокислот в вариабельном участке будет разная. При синтезе новых иммунокомпетентных клеток в результате рекомбинации появляются Т- и В-лимфоциты с различными комбинациями аминокислот в вариабельном участке. Поэтому при внедрении антигена находится иммунокомпетентная клетка с такой последовательностью аминокислот в вариабельном участке, которая будет специфична к эпитопу данного антигена.

22 Общая характеристика семейства иммуноглобулинов. Антитела (иммуноглобулины) – это белковые структуры, которые вырабатываюся в ответ на антигены. Иммуноглобулины синтезируются плазаматическими клетками. Иммуноглобулиновые рецепторы отвечают за гистосовместимость и расположены на поверхности всех ядерных клеток (МНСI) и на иммунокомпетентных клетках и макрофагах (МНСII). Иммуноглобулины состоят из тяжелых и легких полипептидных цепей, соединенных дисульфид

ными связями. Н-цепь – 450 а/к, L-цепь – 210 а/к. (рис). Последовательность аминокислот в Fc-фрагменте всегда постоянна, а Fab-фрагменте последовательность вариабельна Паратоп – вариабельный домен Fab-фрагмента. С помощью паратопов иммуноглобулины реагируют с эпитопами антигенов. Для иммуноглобулинов характерна: 1 – Специфичность – реагирует со строго специфичным антигеном: специфичность обусловлена паратопом. 2 – Гетерогенность – иммуноглобулины могут реагировать с разными антиге

нами если они имеют сходные точки приложения. Моноклональные антитела – строго специфичны, лишены гетерогенности. Гипервареабельный участок является антигеном для самого хозяина и называется идиотпом. Вся молекула иммуноглобулина является антигеном для организма другого вида. По последовательности а/к в Fc-фрагменте различают 5 классов иммуноглобулинов (G, A, M, E, D).

21 Центральные и периферические органы иммунной системы человека. Иммунитет – состояние организма после попадания в него антигена, проявляющееся синтезом антител, сенсибилизированных лимфоцитов и поддерживающее постоянство гомеостаза. За все это отвечает иммунная система: 1 – Центральные иммунные органы: тимус и костный мозг. 2 – Периферические иммунные органы: лимфатические узлы, окологлоточное кольцо, аппендикс, пейеровы бляшки, солитарные фолликулы.

25 Схема формирования иммунной реакции организма. Макрофаг фагоцитирует антиген, происходит процессинг анигена в иммуногенное состояние. Макрофаг выставляет на поверхность МНСII+эпитоп и выделяет цитокины (ФНО, g-интерферон, ИЛ1, ИЛ6).РецепторыТ-предшеств енника узнают ИЛ1 и МНСII+эпитоп на поверхности макрофага (механизм двойного распознавания). После этого предшественни станет либо Т-хелпером, либо Т-киллером. У Т-хелпера есть есть 2 субпопуляции (Тх1 и Тх2). ИЛ10 по

давляет ТХ1, который отвечает за клеточный иммунитет, включается Тх2, который активизирует гуморальный иммунитет. Т-хелпер выделяет ИЛ2, который активизирует Тх2 и самого себя. В очаг воспаления кроме Т-лимфоцитов приходят B-лифоциты, поверхность которых покрыта иммуноглобулинами М в мономерной форме. Антиген может находиться в свободном состоянии и тогда он взаимодействует с тем В-лимфоцитом у которого антитело специфично. Также антиген может быть преподнесен В-лимфоциту ден

дритной клеткой. Происходит процессинг и В-лимфоцит выставляет на поверхность МНСII+эпитоп. В-лимфоциты начинают размножаться и под дейстием цитокинов превращаются в плазматические клетки. ИЛ4 активизирует плазмоциты на синтез IgE; ИЛ5, ИЛ10 – на синтез IgА; ИЛ5 – на синтез IgG. IgG – отвечают за вторичный иммунный ответ, IgM – за первичный иммунный ответ.

4 Общая характеристика группы резидентов человека. Резиденты, заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. Из факторов симбиоза резиденты имеют фактор инфективности и фактор токсичности. Каждая ниша обладает своими анатомо-физиологическими особенностями, поэтому в каждом биотопе находятся разные асоциации микробов. Состав ассоциации зависит от взаимоотношениями между микробами. Абсолютное количество микробов регулируется

макроорганизмом с помощью местных факторов резистентности (неспецифические факторы) и иммунными механизмами. Резиденты могут быть: 1 – постоянными. 2 – транзиторными (временное нахождение микробов из внешней среды). 3 – бактерионосительство. Положительная роль резидентной флоры: 1 – Формирование иммунитета – резиденты дают антигенный стимул иммунокомпетентным клеткам, и на их поверхности появляются рецепторы к этим антигенам. 2 – Резиденты являются антагонистами по отношению к

другим микробам и патогенам, являясь биологическим барьером по принципу экологической ниши. 3 – Резиденты участвуют в метаболизме макроорганизма, синтезируя витамины и ферментируя пищевой субстрат.

13 Определение понятия “инфекционный процесс”, формы инфекционного процесса и условия их формирования. Инфекционный процесс возникает при проникновении микроорганизма в макроорганизм и его размножении в нем. Инфекционный процесс, в зависимости от вирулентности микроорганизма и формы его взаимодействия с макроорганизмом, может иметь различные проявления – от бессимптомного носительства до тяжелых форм инфекционного заболевания. Инфекционная болезнь является

наиболее выраженной формой инфекционного процесса и для нее характерно наличие определенного возбудителя, инкубационного периода, специфичных симптомов и иммунного ответа. Инфекционные болезни вызываются патогенами – это микроорганизмы, которые обладают всеми тремя факторами симбиоза: инфективность (занимает определенную нишу), инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов агрессии проникает в глубь тканей; токсичность (нанесение вреда экзо- или эндотоксинами).

Патогенность – это потенциальная способность микроба нанести вред макроорганизму. Патогенностью обладают патогены, резиденты и гетеробионты.

19 Характеристика понятия “антиген”, общие свойства антигена. Антигены – это вещества, которые при попадании в организм, вызывают механизмы противодействия, проявляющиеся в виде синтеза антител и сенсибилизированных Т- и В-лимфоцитов. Иммуногенность – это способность антигена вызывать синтез особых протективных (защитных) антител и создавать иммунологическую память. Общие св-ва антигенов: 1 – Макромолекулярность (высокий молекулярный вес). 2 – Стабильность пространственной

конфигурации, т.к антитела узнают эту конфигурацию. 3 – Специфичность, которая обусловлена эпитопами (детерминантными группами) – последовательность аминокислот у белков, конечные участки полисахаридов. 4 – Чужеродность (свои клетки тоже в силу каких-то причин могут стать чужеродными). 5 – Способ попадания – в основном парентеральным путем (минуя ЖКТ), за исключением пищевых аллергенов, которые под действием ферментов ЖКТ не расщепляются. 6 – Антиген должен участвовать в

метаболизме клеток хозяина, т.к на месте этого воздействия возникает воспаление.

23 Химический состав и структура антител.. Антитела (иммуноглобулины) – это белковые структуры, которые вырабатываюся в ответ на антигены. Иммуноглобулины синтезируются плазаматическими клетками. Состоят из тяжелых и легких полипептидных цепей, соединенных дисульфидными связями. Н-цепь – 450 а/к, L-цепь – 210 а/к. (рис). Последовательность аминокислот в Fc-фрагменте всегда постоянна, а Fab-фрагменте последовательность вариабельна Паратоп – вариабельный домен Fab-фрагмента. С по

мощью паратопов иммуноглобулины реагируют с эпитопами антигенов. Для иммуноглобулинов характерна: 1 – Специфичность – реагирует со строго специфичным антигеном: специфичность обусловлена паратопом. 2 – Гетерогенность – иммуноглобулины могут реагировать с разными антигенами если они имеют сходные точки приложения. Моноклональные антитела – строго специфичны, лишены гетерогенности. Гипервареабельный участок является антигеном для самого хозяина и называется идиотпом. Вся

молекула иммуноглобулина является антигеном для организма другого вида. По последовательности а/к в Fc-фрагменте различают 5 классов иммуноглобулинов (G, A, M, E, D).

1 Определение понятия “симбиоз”, этапы симбиоза микробов с организмом. Симбиоз – это взаимосвязанный метаболизм различных систем. Возникает между бактериями и макроорганизмами. Этапы симбиоза: 1 – Инфективность – микроб попадает в экологическую нишу, происходит адгезия и при благоприятных условиях колонизируется. Микроб прикрепляется за счет капсулы, пилей, лектиноподобных структур клеточной стенки, ферментов с помощью которых образуются липкие полимеры. Микроб находится

под контролем макроорганизма. 2 – Инвазивность (проникновение) – микроб выходит из под контроля макроорганизма и с помощью ферментов, которые разрушают ткани макроорганизма, проникает в глубь тканей. 3 – Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки). Токсинемия – всасывание токсина в кровь.

2 Факторы симбиоза. Классификация бактерий в зависимости от наличия у них факторов симбиоза. Симбиоз – это взаимосвязанный метаболизм различных систем. Возникает между бактериями и макроорганизмами. Факторы симбиоза: 1 – Инфективность – микроб попадает в экологическую нишу, происходит адгезия и при благоприятных условиях колонизируется. 2 – Инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов проникает в глубь тканей. 3 – Токсичность – нанесение вреда токсинами. Мик

роб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки). Классификация: 1 – Гетеробионты – микробы, которые находятся в окружающей среде; имеют третий фактор (фактор токсичности). 2 – Резиденты – заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. У них есть фактор инфективности и фактор токсичности. 3 – Патогены – имеют все три фактора (инфективности,

инвазивности, токсичности).

5 Факторы симбиоза у резидентов, закономерности формирования резидентной микробной флоры у человека. Резиденты, заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. Из факторов симбиоза резиденты имеют фактор инфективности и фактор токсичности. Инфективность – микроб попадает в экологическую нишу, происходит адгезия и при благоприятных условиях колонизируется. Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при

жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки). Каждая ниша обладает своими анатомо-физиологическими особенностями, поэтому в каждом биотопе находятся разные асоциации микробов. Состав ассоциации зависит от взаимоотношениями между микробами. Абсолютное количество микробов регулируется макроорганизмом с помощью местных факторов резистентности (неспецифические факторы) и иммунными механизмами.

15 Характеристика механизмов неспецифической резистентности человека. 1 – Механизмы непринятия – “видовой” иммунитет (например люди не болеют собачьей чумкой). При определенных экстремальных условиях видовой иммунитет можно преодолеть. 2 – Механизмы противодействия: а – механические факторы (целостность кожных покровов; жирные кислоты, сальные и потовые железы, обладающие бактерицидным действием; лизоцим слизистых оболочек – разрушает гликозидные связи пептидоглика

на в гр+ бактериях), б – химические факторы – HCl желудочного сока, желчные кислоты (резиденты ЖКТ к ним адаптированы), пищеварительные ферменты, в – гуморальные факторы: система комплемента, противовирусные факторы (интерферон a, b; ингибиторы a, b, g), плакины, b-лизины, фибронектин, г – клеточныефакторы:резидент ная микрофлора (является биологическим барьером ко всем микробам, которые не входят в их экологическую нишу), фагоцитоз (поглощение чужеродных частиц и их переваривание).

28 Механизмы протективной активности антител. 1 – Нейтрализация экзотоксина антитоксином. Молекула экзотоксина состоит из двух фракций: А (токсин) и В (носитель и рецептор). Клетка поглощает экзотоксин, образуя вакуоль. Ферменты клетки расщепляют экзотоксин на фракции А и В ® клетка погибает. Антитоксин взаимодействует с В-фракцией и экзотоксин теряет способность попасть в клетку, т.к рецептор закрыт. Анатоксин – обезвреженный экзотоксин (без фракции А). 2 – Нейтрализация адгезивных

свойств микроба – за счет секреторного IgA, который находится на поверхноти слизистых оболочек. 3 – Антитела нейтрализуют факторы агрессии. 4 – Антитела реагируют с микробом. Взаимодействуя со структурами клеточной стенки бактерий, антитела блокируют поступление питательных веществ. 5 – Опсонины – усиливают фагоцитоз. 6 – Лизис бактерий – если на микроб сядет IgG, изменится конформация ® освобождается углеводная часть гликопротеида ® идет активация на мембранеиобразуется МАК, который осу

ществляет лизис бактерии.

7 Определение понятий “дисбактериоз” и “оппортунистическая болезнь” и механизм развития этих процессов. Резиденты, заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. Каждая ниша обладает своими анатомо-физиологическими особенностями, поэтому в каждом биотопе находятся разные асоциации микробов. Состав ассоциации зависит от взаимоотношениями между микробами. Нарушение количественного и качественного состава в определенной ниши называется

дисбактериозом. Заболевания, которые вызываются резидентами называются оппортунистическими. Резиденты могут вызвать заболевание при: 1 – Снижении местных факторов защиты. 2 – Искусственном нарушении состава резидентной микрофлоры (антибиотикотерапия). 3 – Снятии репрессии с генов, отвечающих за инвазионные свойства. Т.е у резидента появляется фактор инвазивности и он становится патогеном.

8 Определение понятия “патоген” и общая характеристика этой группы бактерий. Патогены – это микроорганизмы, которые обладают всеми тремя факторами симбиоза: 1 – Инфективность – микроб попадает в экологическую нишу, происходит адгезия и при благоприятных условиях колонизируется. 2 – Инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов агрессии проникает в глубь тканей. Ферменты агрессии патогенов: гиалуронидаза, фибринолизин, коллагеназа, лецитиназа (расщепляет лецитин,

кот входит в мембраны), нейроминидаза (отщипляет сиаловые кислоты от мукополисахарида), ДНКаза, плазмокоагулаза. 3 – Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактериальной клетки). Заболевания, которые вызывают патогены называются инфекционными.

12 Сравнительная характристика экзо- и эндотоксинов. 1 – Экзотоксины выделяются в процессе жизнедеятельности грам+ бактерий (стрептококк, пневмококк, стафилококк, бациллы, клостридии). Эндотоксин вырабатывается после гибели бактериальной клетки. Холерный вибрион вырабатывает экзотоксин, а после гибели холерного вибриона выделяется эндотоксин. 2 – По химическому составу экзотоксин – это белок, эндотоксин – липополисахарид клеточной стенки (липид А). 3 – При поражении экзотоксином клини

ка зависит от пораженной ткани, а при поражении эндотоксином клиника схожа (/t, \ АД). 4 – У экзотоксина выражены антигенные свойства, эндотоксин – слабый антиген. 5 – Экзотоксин хорошо нейтрализуется антитоксической сывороткой, эндотоксин – плохо. 6 – Экзотоксин используется для получения анатоксина (обезвреженный экзотоксин, сохранивший антигенные свойства).

17 Классификация фагоцитов человека. Стадии фагоцитоза. Характеристика понятий “завершенный” и “не завершенный” фагоцитоз. Фагоцитоз – поглощение чужеродных частиц любой природы и их переваривание. Фагоцитами являются: микрофаги – гранулоциты (нейтрофилы) и макрофаги (моноциты, клетки ретикуло-эндотелиальной системы). Стадии фагоцитоза: 1 – Хемотаксис (в очаг воспаления приходят лейкоциты). 2 – Адсорбция и захват. 3 – Образование фагосомы (соединяется с лизо

сомами и образуется фаголизосома). 4 – Переваривание: кислородзависимое (за счет перекиси водорода) и кислороднезависимое (за счет катионных белков (лактоферин) и лизоцима). Завершенный фагоцитоз – когда микроб переваривается в фагоците, незавершенный фагоцитоз – когда микроб не переваривается, а размножается и в подвижных фагоцитах распространяется по организму. Это происходит из-за структур клеточной стенки бактерий.

18 Общая характеристика системы комплемента. 1 – система комплемента – это группа из 26 сывороточных белков. Их функция – контроль воспаления. Синтезируются в эпителии кишечника, печени, макрофагах, лимфоцитах, селезенке. 2 – При отсутствии внешнего активатора комплемент находится в неактивном состоянии. 3 – активация комплемента происходит классическим путем (в результате образования комплекса АГ+АТ), альтернативным путем (без участия антител), лектиновым (за счет маннозных

структур бактерий). 4 – активация комплемента происходит в строго определенной последовательности, либо путем расщепления неактивных компонентов, либо путем соединения неактивных компонентов с образованием активных. 5 – антимикробная активность заключается в лизисе бактерий или в активации фагоцитов. 6 – участие в анафилактических реакциях за счет образования анафилотоксина. 7 – регуляция иммунного ответа. 8 – участие в аутоиммунных процессах.

ИММУНИТЕТ 3

1 Определение понятия “симбиоз”, этапы симбиоза микробов с организмом

2 Факторы симбиоза. Классификация бактерий в зависимости от наличия у них факторов симбиоза

3 Характеристика гетеробионтов и их роль в инфекционной заболеваемости людей

4 Общая характеристика группы резидентов человека

5 Факторы симбиоза у резидентов, закономерности формирования резидентной микробной флоры у человека

6 Роль резидентов в инфекционной заболеваемости человека

7 Определение понятий “дисбактериоз” и “оппортунистическая болезнь” и механизм развития этих процессов

8 Определение понятия “патоген” и общая характеристика этой группы бактерий.

9 Сравнительная характеристика понятий “патоген” и “патогенность”

10 Сравнительная характеристика понятий “патогенность” и “вирулентность”.

11 Характеристика факторов вирулентности микробов

12 Сравнительная характристика экзо- и эндотоксинов

13 Определение понятия “инфекционный процесс”, формы инфекционного процесса и условия их формирования

14 Сравнительная характеристика оппортунистической и инфекционной болезни

15 Характеристика механизмов неспецифической резистентности человека

16 Клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности

17 Классификация фагоцитов человека. Стадии фагоцитоза. Характеристика понятий “завершенный” и “не завершенный” фагоцитоз

18 Общая характеристика системы комплемента

19 Характеристика понятия “антиген”, общие свойства антигена

20 Характеристика бактериальных антигенов

21 Центральные и периферические органы иммунной системы человека

22 Общая характеристика семейства иммуноглобулинов

23 Химический состав и структура антител

24 Классификация антител. Принцип деления антител на классы

25 Схема формирования иммунной реакции организма

26 Механизм антигеннезависимого формирования специфичности Т- и В-лимфоцитарных систем

27 Теории иммуногенеза

28 Механизмы протективной активности антител

29 Принципы профилактики инфекционной заболеваемости

3 Характеристика гетеробионтов и их роль в инфекционной заболеваемости людей. Гетеробионты – микробы, которые находятся в окружающей среде. Из факторов симбиоза гетеробионты имеют только третий фактор (фактор токсичности). Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки). Гетеробионт может нанести вред макроорганизму при: 1 –

Ослаблении местных и общих факторов защиты. 2 – Попадании гетеробионтов в макроорганизм необычным путем из окружающей среды. 3 – Попадании гетеробионтов в большом количестве. Гетеробионты вызывают заболевания – токсикозы.

14 Сравнительная характеристика оппортунистической и инфекционной болезни. 1 – Инфекционная болезнь вызывается патогенами (обладают всеми тремя факторами симбиоза: инфективность, инвазивность, токсичность); оппортунистическая болезнь вызывается резидентами при ослаблении местных факторов защиты. 2 – Для инфекционных болезней характерна высокая контагиозность (заразительность); для оппортунистических – нет.. 3 – Для Для инфекционных болезней характерен инкубационный

период, для оппортунистических – нет. 4 – Клиника инфекционных болезней зависит от особенностей микроба, а при оппортунистических болезнях – от местных факторов резистентности. 5 – При инфекционных болезнях сила имунного ответа высокая, при оппортунистических болезнях иммунный ответ слабый.

16 Клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности. Гуморальные факторы: система комплемента, противовирусные факторы (интерферон a, b, ингибиторы a, b, g),плакины,b-лизины, фибронектин. Клеточные факторы: 1 – Резидентная микрофлора – является биологическим барьером ко всем микробам, которые не входят в их экологическую нишу. Также существует микробный антагонизм: перекись водорода, колибактерин, коллецины (антибиотикоподобные вещества), бактериальный ли

зоцим (стафилококк), кислоты (в кишечнике гнилостные бактерии). 2 – Фагоцитоз – поглощение чужеродных частиц любой природы и их переваривание. Фагоцитами являются нейтрофилы и макрофаги (моноциты, клетки ретикуло-эндотелиальной системы).

6 Роль резидентов в инфекционной заболеваемости человека. Резиденты, заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. Из факторов симбиоза резиденты имеют фактор инфективности и фактор токсичности. Резиденты могут нанести вред макроорганизму при: 1 – Снижении местных факторов защиты. 2 – Искусственном нарушении состава резидентной микрофлоры (антибиотикотерапия). 3 – Снятии репрессии с генов, отвечающих за инвазионные свойства. Т.е у

резидента появляется фактор инвазивности и он становится патогеном.

9 Сравнительная характеристика понятий “патоген” и “патогенность”. Патогены – это микроорганизмы, которые обладают всеми тремя факторами симбиоза: инфективность (занимает определенную нишу), инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов агрессии проникает в глубь тканей; токсичность (нанесение вреда экзо- или эндотоксинами). Патогенность – это потенциальная способность микроба нанести вред макроорганизму. Патогенностью обладают патогены, резиденты и гетеробионты.

11 Характеристика факторов вирулентности микробов. Патогенность – это потенциальная способность микроба нанести вред макроорганизму. Вирулентность – это мера патогенности, степень болезнетворности микробов, обусловленная набором факторов инвазивности и токсичности. Инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов агрессии проникает в глубь тканей. Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А –

липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки).

10 Сравнительная характеристика понятий “патогенность” и “вирулентность”. Патогенность – это потенциальная способность микроба нанести вред макроорганизму. Патогенностью обладают патогены, резиденты и гетеробионты. Вирулентность – это мера патогенности, степень болезнетворности микробов, обусловленная набором факторов инвазивности и токсичности.

20 Характеристика бактериальных антигенов. Антигены – это вещества, которые при попадании в организм, вызывают механизмы противодействия, проявляющиеся в виде синтеза антител и сенсибилизированных Т- и В-лимфоцитов. Антигены бактериальной клетки: 1 – Поверхностно расположенные антигены: жгутики, пили, капсула, клеточная стенка. 2 – Антигены, находящиеся внутри клетки и освобождающиеся после ее гибели: эндотоксин, липополисахарид. 3 – Антигены, выделяющиеся при жизнедея

тельности бактерий: экзотоксин, ферменты. Антигены Гр+ стенки: тейхоевые кислоты, пептидогликаны, белки. Антигены Гр- стенки: О-антиген (соматический антиген – это глюцидолипидополипептидны й комплекс), Н-антиген (жгутиковый белковый антиген).

26 Механизм антигеннезависимого формирования специфичности Т- и В-лимфоцитарных систем.Молекулаиммуноглоб улина состоит из константной части и вариабельной части. За синтез Fc-фрагмента отвечает С-ген. За синтез вариабельного фрагмента отвечает V-ген (около 200), D-ген (около 80) и J-ген (около 5). В процессе созревания иммунокомпетентных клеток идет рекомбинация этих генов, поэтому последовательность аминокислот в вариабельном участке будет разная. При синтезе новых имму

нокомпетентных клеток в результате рекомбинации появляются Т- и В-лимфоциты с различными комбинациями аминокислот в вариабельном участке. Поэтому при внедрении антигена находится иммунокомпетентная клетка с такой последовательностью аминокислот в вариабельном участке, которая будет специфична к эпитопу данного антигена.

4 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Туберкулеза. Микроскопический метод – исследуемый материал: мокрота, моча, спиномозговая жидкость. При окраске мазков мето­дом по Цилю-Нильсену туберкулёзные палочки окрашивают­ся в ярко-красный цвет, располагаются поодиночке или не­большими скоплениями. Микроскопическое исследование является ориентиро­вочным и позволяет судить лишь о наличие кислотоустойчи­вых бактерий в материале без определения их родовой

принадлежности. Бактериологическое исследование. Особенности метода: 1 – Для освобождения от сопутствующей микрофлоры ис­следуемый материал обрабатывают 10% серной ки­слотой или 4-6% раствором едкого натра, центрифу­гируют. Кислоту нейтрализуют, а материал засевают внесколько пробирок со средой Левенштейна-Иенсена или другими специальными средами. 2 – Посевы инкубируют при 37° С 4-6 недель и более, так как туберкулёзная палочка размножается очень мед­ленно. Рост М. tuberculosis на сре

де имеет вид сероватого или светло-кремового, морщинистого или крошкообразного сухо­го налёта. 3 – При иддентификации культуры чаще всего определя­ют способность выделенной культуры синтезировать никотиновую кислоту – неациновая проба Конно, с помощью которой удаётся отличить М, tuberculosis, хорошо синтезирующие никотиновую кислоту, от па­лочек М. bovis, образующих её вминимальныхколи­чествах. 4 – Выявление корд-фактора. Для ускоренной диагностики туберкулёза используют, метод

микрокультур Прайса. Для этого на нескольких предметных стёклах делают толстые мазки из иссле­дуемого материала. Мазки обрабатывают 2-6% серной кислотой и нейтрализуют щёлочью, после этого их помещают во флаконы с гемолизированной цитратной кровью. Через 7-14 дней мазки окрашивают по Цилю-Нильсену и микроскопируют – вирулентные штаммы образуют микрокультуры, имеющие вид жгутов или кос (корд-фактор). 5 – Определение чувствительности к антибиотикам и химиотерапевтическим

препаратам проводят методом серийных разведений. Биологический метод (когда не ясна клиника). Применяется с целью выделения чистой культуры возбудителя туберкулёза из органов животного, заражённого исследуемым материалом, а также для определения вирулент­ности этих микобактерий. Серодиагностика. Используют в качестве дополнительного теста РСК и РИГА.. Положительные результаты отмечаются при активном туберкулёзе, а также при инфицировании туберкулёза и вак­цинации. Кожно-

аллергическая проба.. Ставится с туберкулином – очищенной белковой фракцией (ППД=РРД), полученной из микобактерий туберкулёза, для ха­рактеристики, оценки течения туберкулёзного процесса, оп­ределения эффективности вакцинации и отбора контингентов для ревакцинации против туберкулёза. Туберкулин вводят внутрикожно в строго определённой дозировке (реакция Ман­ту).Специфическая профилактика осуществляется вакциной БЦЖ (авирулентный живой микроб M. Bovis вводится на первой недели

жизни). Ревакцинацию проводят в 7 лет и далее с интервалом в 5 лет до 30 летнего возраста при отрицательных туберкулиновых пробах.

28 Возбудители гриппа, методы лабораторной диагностики. Антигеннаяизменчивостьвиp yca. Специфическая профилактика гриппа. Возбудители – вирусы гриппа, РНК – геномные, родов А, В и С. Антигенные свойства вируса гриппа А. У вирусов гриппа известно несколько антигенов: один антиген это S-антиген, он связан с рибонуклеопротеидом, то есть внутренний антиген. По S-антигену вирусы гриппа легко разделяются на вирусы гриппа А, гриппа В, гриппа С. Антигенный перекресток тут не

возможен, так как имеется строгая антигенная специфичность. Поверхностные антигены: гемагглютинин и нейраминидаза. Известны следующие типы вируса гриппа: 1.вирус гриппа А с антигенами Н0N1. 2. Вирус гриппа А с антигенами H1N1. 3. H2N2 4. H3N2. Изменчивость вируса гриппа А. Изменчивость вируса гриппа обусловлена двумя генетическими процессами: 1. Генетический шифт возникает в результате полной смены гена и обусловлен обменом генов при одновременной репродукции в клетке двух

вирусов гриппа 2.антигенный дрейф – изменение антигенного состава, без полной замены антигена. Внутри антигена происходят небольшие изменения. В основе антигенного дрейфа лежат точечные мутации гена, а как следствие изменения антигена. Иммунитет при гриппе напряженный, типоспецифический. Лабораторная диагностика. Существует три основных метода: 1.Экспресс диагностика: иммунофлюресцентный метод, ИФА. Метод иммунофлюоресценции: больному в носовой ход вводится шлифованное стекло и

делается легкий соскоб. Потом стекла обрабатывают люминесцирующими сыворотками и если в клетке есть вирусный антиген, антитела буду с ним реагировать и мы увидит свечение. 2.Вирусологический. Берут смыв из носоглотки больного, заражают куриный эмбрион, после инкубации проверяют наличие вируса по реакции гемагглютинации – вирус гриппа склеивает эритроциты за счеч наличия поверхностного гемагглютинина. 3.Сероидентификация вируса гриппа осуществляется с помощью реакции торможения

гемагглютинации (РТГА). К вирусу добавляют типоспецифическую сыворотку (а/т), а затем эритроциты. Специфическая профилактика. Для профилактики гриппа ис­пользуют ремантадин, который подавляет репродукцию вируса грип­па типа А. Для пассивной профилактики применяют противогрип­позный иммуноглобулин человека, полученный из сыворотки крови доноров, иммунизированных гриппозной вакциной. Для вакцино-профилактики используют живые и инактивированные вакцины. При введении

живых вакцин формируется как общий, так и местный иммунитет. В настоящее время получены инактивированные вакцины различ­ных типов: вирионные, субъединичные, расщепленные и смешанные. Вирионные вакцины получают путем высококачественной очистки вирусов, выращенных в куриных эмбрионах. Субъединичные вакци­ны представляют собой очищенные поверхностные антигены вируса гриппа — гемагглютинины и нейраминидазу. Расщепленные вакцины получают из очищенной суспензии вирионов

путем обработки детер­гентами.

29 Возбудителтг гепатита, методы лабораторной диагностики и специфической про­филактики гепатита. Гепатиты - это воспалительные поражения печени, вызванные различными этиологическими факторами. Гепатиты могут быть неинфекционные: лекарственные (при использовании некоторых антибиотиков) и токсические (при употреблении алкоголя, ядовитых шляпочных грибов). Инфекционные гепатиты могут быть вызваны различными группами микроорганизмов - простейшими (токсоплазмы),

бактериями (лептоспиры, иерсинии), вирусами (вирус Эпштейна-Бара, цитомегаловирус). К возбудителям вирусных гепатитов относятся также вирусы гепатита А,В,С,Д.Е,F. У вирусов гепатита А,В,С,Д,Е,F единственной мишенью в организме являются гепатоциты, поэтому данные возбудители относятся к первичным возбудителям вирусных гепатитов. Вирус гепатита А (НАV). Диагностика. Включает в себя серодиагностику – определение иммуноглобулинов класса М в ИФА, поиск вирусных антигенов в крови с помо

щью ИФА, используют ДНК-зонды, иммуно-электронную микроскопию (ИЭМ) - можно увидеть вирус (дорогие методы). При подозрении на гепатит А ставят биохимические тесты, определяя активность ферментов АлАТ, АсАТ, количество билирубина. Профилактика. Для специфической профилактики - инактивированная убитая вакцина из вируса гепатита А. Иммунизации подвергаются дети, медперсонал. Вирус гепатита Е (HEV) сходен с вирусом гепатита А. Специфическая профилактика не разработана. Ди

агностика - применяется иммуно-электронная микроскопия, можно определить в сыворотке антигены с помощью иммуно-ферментного анализа. Вирус гепатита В (HBV). Профилактика. Специфическая – генноинжинерная вакцина (дрожжевая) получают путем пересадки гена, отвечающего за продукцию Hbs Ag в клетке дрожжей. С помощью этой вакцины иммунизируют детей родившихся от матерей страдающих гепатитом В, медработникам. Диагностика. Заключается в обнаружении Hbs Hbc Hbe Ag c

помощью иммуноферментного анализа и в обнаружении антител - антиНвс и антиНве иммуноглобулины. Гепатит Д. (HDV). Диагностика. Возможна по антигенам и антителам с помощью ИФА. Гепатит С (НСV). Диагностика. Сводится к определению антител. Из всех видов гепатитов, только гепатит А дает устойчивый иммунитет, так что можно переболеть несколькими гепатитами (А+В,В+Д и даже А+В+Д, а потом С).

2 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Дифтерии. Основной метод диагностики – бактериологический. Материал засевают на элективные кровяно-теллуритовые среды (среда Клауберга), где подавляется рост сопутствующей флоры. На теллуритовой среде C..diphtheriae образует черные колонии засчетвосстановления теллурита. Колонии пересевают на кровяной агар для получения чистой культуры. Для подтверждения диагноза дифтерии в первую очередь необходимо установить ток

сигенность выделенной культуры (способность к продукции дифтерийного токсина) с помощью различных серологических реакций. Оп­ределение токсигенности – реакция преципитации в агаре с антитоксической противодифтерийной сывороткой: в чашку Петри с агаром, содержащим лошадиную сыворотку, мальтозу и цистин, кладут полоску фильтровальной бумаги, пропитанную анти­токсической противодифтерийной сывороткой. Затем засевают исследуемые культуры в виде перпендикулярных к бумаге штри

хов. В качестве контроля используют заведомо токсигенную куль­туру. Посевы инкубируют при 37 "С до следующего дня. При размножении токсигенной культуры в месте соединения ток­сина с антитоксическими антителами образуется преципитат в виде белых линий - "усов". Выделенную культуру идентифицируют и дифференцируют по морфоло­гическим особенностям, культуральным и биохимическим признакам: пробы на цистиназу, уреазу, ферментация углево­дов и др. Для определения цистиназы (проба Пизу) в

столбик питательного агара с цистином уколом засевают исследуемую культуру. C.diphtheriae вызывают почернение среды по ходу посева (в ре­зультате образования сульфида свинца). Для определения уреазы (проба Закса) готовят спирто­вой раствор мочевины и раствор индикатора - фенолового красного, затем исследуемые бактерии петлей вносят и растирают по стенке пробирки. После 20—30-минутной инкубации при 37 °С наблюдают расщепление мочевины уреазой, в результате чего среда при

обретает красный цвет. Профилактика: Получение дифтерийного анатоксина:кэкзотоксину добовляют формалин, и ставят в термостат при t – 40 на 3-4 недели. За это время фермент А разрушается, токсические св-ва исчезают, а антигенные св-ва сохраняются. Антитела вырабатываются к фракции В, и попавшая молекула экзотоксина прикрепиться не может, и выводится через почки. Активная профилактика: вакцины: дифтерийный анатоксин, АКДС, АДС, АКДС+полимиелит. Пассивная профилак

тика – не вакцинированным детям вводят противодифтерийную анатоксическую сыворотку, примерно 5000МЕ. При тяжел формах дифтерии используют анатоксическую противодифтерийную сыворотку по Безредко, примерно 100000МЕ. Получение антитоксической сыворотки – иммунизируют лошадь дифтерийным анатоксином.

1 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Дифтерии. Факторы вирулентности. Возбудителем явл коринебактерия. Морфолог св-ва: палочка, на концах имеет утолщения – волютин (по хим составу явл полифосфатами). В чистой культуре располагается под углом. Гр+ , красят ее уксусно-кислой синькой, либо по Нейсеру. Имеет микрокапсулу, и в клеточной стенке факторы адгезии. Культивирование: требовательная, растет на средах с добавлением сыворотки: среда Ру (свернутая лоша

диная сыворотка), среда Леффлера (три части свернутой сыворотки и одна часть сахарного бульона). Эти сыворотки используют для получения чистых культур. Первичный посев делают на кровяно-теллуритовые среды (среда Клауберга), где подавляется рост сопутствующей флоры. На этих средах различают три биовара: 1 – gravis (R-формы, серые с шероховатыми краями), 2 – mitis (S-форма, гладкие, блестящие, с ровными краями, черного цвета), 3 – intermedius. Резиденты – ложнаядифтерийнаяпалочка (палочка Гоффмана),

обитает на слизистых полости рта. Палочка Xerosis – обитает на слизистой носа. Ложные палочки на этих средах будут коричневого цвета. Биохимическая активность: наряду с другими ферментами возбудитель дифтерии обладает цистиназой и уреазой. Gravis ферментирует крахмал и гликоген в отличие от mitis. Факторы вирулентности: фактор адгезии клеточной стенки, корд-фактор, фактор инвазивности – гиалуронидаза, экзотоксин – действием которого обьясняется патогенез заболевания.

3 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Туберкулеза. Факторы вирулентности. Источник инфекции – больной человек. Морфологические свойства: тонкая, изящная, слегка изогнутая, гр+. Из–за высокого содержания липидов окрашивается по Цилю-Нильсену (красный цвет). Имеет кислотоустойчивые участки (зерна Муха). Под действием лек препаратов превращается в: L формы, фильтрующиеся формы (проходит через бактериальные фильтры), ветвящиеся формы. Куль

туральные св-ва: размножается медленно, требовательная (глицерин, желток, картофельная мука, аспарагиновые кислоты и др). Культивируют ее на среде Левенштейн-Йенсена (желток, картофельная мука, аспарагиновая кислота, малахитовая зелень для подавления сопутствующей микрофлоры). Растет 3-4 недели. Биохимические свойства: микобактрии туберкулеза дают положительный результат при ниациновом тесте, редуцируют нитраты, разлагают мочевину, никотинамид, пиразинамид. Факторы вирулентности: к

пептидогликану через фосфарные остатки присоединяется вещ-во ЛАМ (липидоарабиноманозный комплекс). Маноза на верхушке ЛАМ дает сродство к макрофагам. Имеется корд-фактор в состав которого входят миколиевые кислоты.. Этот фактор имеется только у вирулентных форм. В кл стенке нах-ся белковые молекулы – туберкулопротеины. Также имеются гликолипиды, которые придают устойчивость во внешней среде. Сульфолипиды – нарушают переваривание туберкулезной палочки в фагосоме (незавершенный

фагоцитоз).

8 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика кишечных заболеваний. Для большинства кишечных инфекций ведущим методом диагностики является бактериологический. Исследуемый материал (фекалии) засевают на дифференциально диагностическую среду (Эндо) и ставят в термостат. Через сутки выросли 2 типа колоний: 1 – Lac+ - гладкие, малинового цвета сметаллическимотливом, круглой формы Е.Соli. 2 – Lac- - бесцветные колонии (патогенные микробы). Из колонии

Lac-: 1 – приготовлен мазок, окрашен по грамму. При микроскопии – Гр- палочки. 2 – Определение подвижности методом “висячей капли”. 3 – Получение чистой культуры (среда Ресселя). Для определения родовой принадлежности Гр- палочек ставят реакцию аггютинации на стекле с поливалентными агглютинирующими сыво-ротками (сальмонеллезными, эшерихиоз-ными, дизентерийными). Допустим реакция положительна с сальмонеллезной сыворот-кой Þ Гр- палочка относится к роду Salmo

nella. Исследуемую сальмонеллу пересевают на среду Ресселя для выделения чистой культуры. Идентификация сальмонелл: 1 – Посев на среды Api или Enterotest или Enterotube для определения б/х активности. 2 – Для более точного определения вида сальмонелл ставят реакцию агглютинации на стекле с сальмонелезными сыворотками. Профилактика: проведение санитарно-гигиенических мероприятий, заключающихся, в частности, в правильной обработке мяса и др пищевых продуктов.

14 Микробиологическая диагностика и профилактика стрептококковых заболевании Методы диагностики: Основной метод диагностики – бактериологический. Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на кровяной агар для получения изолированных колоний. Затем производят учет результатов посева: характрер колонии, характер гемолиза. По характреу гемолиза на кровяном агаре стрептококки делятся на 3 группы: а – b-гемолитические – образуют вокруг колонии полностью прозраз

ную зону гемолиза, б – a-гемолитические – неполный гемолиз, образующийся метHb дает зеленоватый оттенок (зеленящий стрептококк), в – g – негемолитические стрептококки.Затемвыросши е изолированные колонии пересевают на скошенный агар для получения чистой культуры. Заключительный этап – идентификация чистой культуры по культуральным признакам, сероидентификация и серотипирование (определение серогруппы). Серогруппу стрептококков определяют в реакции преципитации с экстрактом из иссле

дуемой культуры и группоспецифическими сыворотками (4 наиболее распространенные серогруппы – А, В, С, Д). Иммунитет: антитоксический, антимикробный, типоспецифический, нестойкий, с тенденцией к подавлению фагоцитоза, с образованием L-форм, к хронизации процесса. Специфической профилактики нет. Лечение – антибиотикотерапия.

6 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Сифилиса. Методы диагностики: 1 – микроскопический (1-2 ст), 2 – серологический (реагиновые тесты, когда в качестве антигена используют кардиолипиновый антиген из сердечной мышцы быка), 3 – специфические реакции, когда используются трепонемальные тесты (трепонема Никольса – культуральные спирохеты, выращенные на искуственной питательной среде и не обладающие вирулентностью, антигенными св-ми отличаются от

бледной спирохеты). Из трепонемальных тестов в настоящее время используют иммунофлюорисцентный адсорбционный тест (ИФАТ) и трепонемальную микрогемагглютинацию. Постановка реакции Вассермана: Для постановки реакции связывания комплемента по Вассерману при подозрении на сифилис необходимы сле­дующие компоненты: 1. Исследуемая сыворотка больного в разведении 1:5. Исследуемую сыворотку необходимо прогреть в тече­ние 30 минут при температуре 56°С для разрушения (инакти

вации) комплемента. 2.Неспецифический антиген – кардиолипиновый анти­ген – холестеринизированный спиртовой экстракт из сердечной мышцы быка. 3.Комплемент – в качестве комплемента используют сыворотку морской свинки. Так как количество ком­племента должно быть строго определенным, компле­мент берут в рабочей дозе (титр, увеличенный на 25-30%). Титр комплемента – это минимальное его коли­чество, при котором еще происходит гемолиз.. 4.Гемолитическая система – это смесь гемо

литической сыворотки и эритроцитов барана, которую перед по­становкой РСК выдерживают в термостате при 37°С в течении 30 минут для адсорбции гемолизинов на по­верхности эритроцитов. Реакцию Вассермана ставят по методи­ке РСК. Отсутствие гемолиза в опытной пробирке свидетельствует о положительной реакции Вассер­мана. Наличие гемолиза в опытной пробирке – отрицательная реакция Вассермана (человек здоров). Иммунитет изучен недостаточно 1 ст у 30% болезнь заканчивается самоизличением и по

вторного заражения не происходит. 2 ст у части людей не происходит заражения на второй стадии, т.к спирохета не изменяет свои антигенные св-ва. Профилактика: специфической профилактики нет, неспецифическая – соблюдени правил гигиены, учет и госпитализация больных сифилисом.

12 Микробиологическая диагностика и профилактика стфилококковых заболеваний. Лечениеи профилактика: а – вакцины, сыворотки, g-глобулины – для всех инфекций, б – профилактика–стафилококко вый анатоксин – вводится тем лицам, которым предстоят серьезные пластические операции. Смотрим на стойкость иммунитета и на типоспецифичность. С целью лечения стафилококковый анатоксин может использоваться при хронических инфекциях (пиодермия, пневмония, остеомиелит). Для про

филактики – искусственный, активный, антитоксический стафилококковый анатоксин; в – аутовакцинотерапия – от больного выделяют его штамм стафилококка, убивает его и вводят собственный аутоштамм; г – стафилококковый g-глобулин (содержит антитела) – применяютдлялечения хронических инфекций, д – гиперимунная антитоксическая донорская плазма – получают путем иммунизации донора стафилококковым анатоксином; применяют для лечения стафилококкового сепсиса. Методы диагностики. Основной ме

тод диагностики – бактериологический. Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на кровяной, молочно-солевой и желточно-солевой агары. Выросшие изолированные колонии пересевают на скошенный агар для получения чистой культуры. Идентификацию чистой культуры проводят по морфологическим, культуральным и б/х св-вам, затем определяют факторы вирулентности. Для определения гемолитических св-в экзотоксина культура стафилококка засевается на кровяной агар и опреде

ляется зона гемолиза. Для определния фермента лецитиназы стафилококк засевают на желточно-солевой агар – вокруг колонии – зона помутнения среды за счет ресщепления лецитина. Для определения фермента плазмокоагулазы стафилококк засевают в цитратную плазму – происходит коагуляция плазмы с образованием сгустка фибрина. Для патогенного стафилококка хар-но сбраживание маннита в анаэробных условиях – при расщеплении маннита образуются кислые продукты, которые изменяют цвет индикато

ра в среде (индикатор Андреде – красная окраска, ВР – синюю). С целью идентификации можно провести фаготипирование. При стафилококковых инфекциях необходимо проверять чувствительность к антибиотикам (метод дисков). Лекарственная резистентонсть обуловлена: синтезом b-лактамазы, R-плазмидами,лизогеннойко нверсией.

11 Морфологические культуральные и биохимические свойства стафилококков. Факторы вирулентности. Вызывает пиодермию, остеомиелит, токсикоз. 1 – Морфологическая хар-ка: Гр + кокки, расп в чистой культуре гроздьевидно. У некоторых имеется микрокапсула. На поверхности имеется белок А – способствует адгезии. 2 – Культуральные св-ва: по типу дыхания – факультативный анаэроб, неприхотлив. Устойчив к концентрации соли до 10% NaCl. Элективные среды: солевой агар, молочно-солевой

агар, желточно-солевой агар (на нем определяют фермент лецитиназу). Б/х активность – слабая, выражена ферментация маннита. 3 – Антигенная структура разнобразна, его типируют по чувствительности к бактериофагам – фаготип. Имеет эпидемиологическое значение. Стафилококк выделяет пигмент: золотистый (s. aurus) – патогенный, белый (s. еpidermidis) – на коже, лимонно-желтый (s. saprophiticus). 4 – Факторы вирулентности: а – факторы адгезии – белок А – неспецифически связывает Fc-фрагмент а/т и тем самым

уменьшает кол-во а/т – препятствует фагоцитозу, б – факторы инвазивности (агрессии): гиалуронидаза, плазмокоагулаза, коллагеназа, фибринолизин, ДНКаза, в – факторы токсичности: выделяет экзотоксин, кот обладает различными биологич св-вами: гемолизин (растворяет эритроциты), лейкоцидин (растворяет лейкоциты), энтеротоксин (вызывает ПТИ, гастроколиэнтериты у детей грудного возраста), эксфолиативный токсин (вызывает пузырчатку новорожденных, у взрослых – стафилококковую эпидермию), этот экзоток

син является супера/г, вызывает синдром токсического шока – неспецифическая реакция с выделением цитокинов. Стафилококк явл антагонистом по отношению к некоторым микробам за счет выделения лизоцима. Иммунитет – антитоксический, антибактериальный, типоспецифический, кратковременный, имеет место тенденция к хронизации процесса за счет снижения уровня фагоцитоза, неспецифического связывания антител, за счет перехода в L-формы и за счет появления лекарственно-резистентых штаммов. Лекарст

венная резистентонсть обуловлена: синтезом b-лактамазы, R-плазмидами (передаются путем коньюгации), r-плазмидами – нетрансмиссивная, передается путем трансдукции (с помощью умеренного фага).

13 Морфологические культуральные и биохимические свойства стрептококков. Факторы вирулентности.(S.Mutans). Вызывает ревматизм, скарлатину, рожистое воспаление, эндокардит, гломерулонефрит. Является резидентом человека. Морфологическая хар-ка: Гр+ кокки, располагаются в виде цепочки, имеют микрокапсулу, иногда имеют вытянутую форму (стрептококки гр Д – энтерококки). Культуральные св-ва: мелкие, точечные, бесцветные колонии, требовательны к добавлению сахаров и хорошо растут на

кровяном агаре. Они факультативные анаэробы, фермента каталазы у них нет, а в крови есть. Встречаются строгие анаэробы – пептострептококки (они наши резиденты, могут учавствовать в оппортунистических инфекциях). Классификация в зависимости от характра роста на кровяном агаре: а – b-гемолитический стрептококк, б – a-гемолиз – неполный гемолиз, образующийся метHb дает зеленоватый оттенок (зеленящий стрептококк), в – g – негемолитические стрептококки. S. Mutans является основой образования зуб

ного налета. Расщепляет сахарозу с декстраном, образует липкий полимер, к которому прилипают другие микробы. Факторы вирулентности: 1 – выделяет гемолизин: стрептолизин О и стрептолизин S. Титры антистрептолизина О свидетельствуют о наличии хронической стрептококковой инфекции (фронтит, гайморит, пародонтит, цистит), 2 – выделяет фибринолизин – стрептокиназу, 3 – выделяет стрептодорназу – разрушает ДНК, 4 – выделяет фактор М – связывает Ig, 5 – имеет микрокапсулу, 6 – имеет факторы инвазивно

сти – гиалуронидаза, 7 – имеет протеиназу – разушает комплемент, тем самым нарушает фагоцитоз, 8 – имеет экзотоксин, который обладает гемолитическим и летальным св-вами, разрушает лейкоциты (лейкоцедин), а у скарлатинозного стрептококка имеется эритрогенный токсин (вызывает алую сыпь).

5 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Сифилиса. Факторы вирулентности. T..pallidum (бледная спирохета) – возбудитель. Сифилис – это длительное циклическое заболевание поражающее у чел органы и ткани, является антропонозным. Морфология: имеют спирально скрученные миофибриллы, микрокапсулу, пептидогликаны, клеточную стенку (состоит из 3х слоев и в ней нет липида А). Бледная спирохета окрашивается по Романовскому–Гимза в бледно – розовый цвет, а

наши резиденты в голубой цвет (обитают на слизистых оболочках). Под действием лек препаратов и антител превращается в L формы, образует гранулярные формы и цисты. По типу дыхания – анаэроб. Плохая окраска связана с низким содержанием нуклеопротеидов. Культивирование: культуральная спирохета (спирохета Рейтера) – авирулентная и с измененными антигенами. Тканевая спирохета (Никольса) – получают заражением кролика в яички (тестикулярная культура). Антигенная структура – имеет 4 антигена:

белковый, полисахаридный, 2-а липидных: первый имеет общие эпитопы с липидами сердца, а второй с липидами нервной ткани человека. Источник – больной человек. Пути передачи – половой, контактный, реже бытовой, т.к она быстро погибает в окружающей среде, чувствительна к высоким температурам (45С), раствору сулеймы и сохраняется при низких температурах. Факторы вирулентности: токсинов у нее нет, размножается во внеклеточном пространстве, есть фермент гиалуронидаза, будучи без клеточной стенки

и имеющей микрокапсулу обладает большой агрессивностью.

7 Морфологические, культуральные, биохимические свойства Кишечной палочки. Роль кишечной палочки в инфекционной патологии у человека. Морфологические свойства: Е.Соli – мелкиеГр-палочки с закругленными концами, перетрих (много жгутиков), иногда образуют микрокапсулу. Культуральные свойства: Е.Соli – факультативный анаэроб, не требовательна к питательным средам, хорошо растет на простых питательных средах. Для диагностики используют дифференциально-

диагностические среды (Эндо, Левина). Ферментативная активность: в течении 24 часов ферментирует лактозу с образованием кислоты и СО2, а белок – с образованием индола. Антигенная стуктура: Е.Соli обладает О-антигеном (соматический), Н-антигеном (жгутиковый) и К-антигеном (капсульный). К-антиген неоднороден – состоит из термостабильных антигенов (А и М) и термолабильных (L, B, Vi). Идентификация идет по О- и Н-антигену. Положительная роль Е.Соli: 1 – Является антагонистом по

отношению к патогенным и гнилостным бактериям, за счет того, что она является возбудителем молочно-кислого брожения (образует кислую среду). Образует колицины – антибиотикоподобные вещества. 2 – Синтез витаминов группы В и К. 3 – Участие в процессах расщепления. 4 – Стимулирует образование на слизистых оболочках sIgA. Отрицательная роль: при ослаблении защитных свойств организма Е.Соli может стать причиной развития кишечных инфекций и некишечных инфекций (цистит, отит).

Уменьшение количества Е.Соli приводит к дисбактериозу (при лечении антибиотиками). Факторы вирулентности: пили, гиалуронидаза (фермент инвазивности), эндотоксин.

9 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителяХолеры.Морфоло гические свойства: холерный вибрион – слегка изогнутая Гр- палочка, имеет жгутик, иногда окружаетсебякапсулой из муцина, что закрывает поверхностные антигены. Культуральные свойства: по типу дыхания аэроб, очень неприхотлив, растет на самых простых средах (даже на 1% пептонной воде), растет при рН 8,2-8,4 (используется в элективных средах). Дифференциально-диагности ческой средой является TCBS, на

которой колонии холерного вибриона желтого цвета. Антигенные структуры: О-антиген (соматический) и Н-антиген (жгутиковый). В О-антигене есть антигены А,В,С, по которым различают 3 серовара: Огава (А,В), Инаба (А,С), Гикошима (А,В,С). Для вакцины используют серовары Огава и Инаба.. Биохимические свойства: при идентификации важным является отношение холерного вибриона к маннозе, арабинозе и сахарозе. По способности ферментировать эти углеводы семейство Vibrionaceae делят на 8 групп. Хо

лерный вибрион относится к первой группе (манноза+, арабиноза-, сахароза+). Факторы вирулентности: 1 – муциназа – расщипляет муцин, который выстилает эпителий кишечника. 2 – нейроминидаза – фермент инвазивности.. 3 – фибринолизин, 4 – плазмокоагулаза, 5 – эндотоксин, 5 – экзотоксин.

30 Возбудители СПИДа, методы диагностики и профилактики болезни. Возбудители ВИЧ-инфекции относится к семейству ретровирусы. Представители этого семейства поражают самых различных животных – грызунов, птиц, млекопитающих, человека. Вирусы входящие в это семейство являются РНК-овыми, они способны с помощью фермента обратной транскриптазы образовывать ДНК на матрице вирусной РНК. ДНК затем способна встраиваться в хромосому клетки и существовать там. Этим обусловлены осо

бенности эпидемиологии ретровирусных инфекций -- наличие как горизонтального, так и вертикального пути передачи. Диагностика: а/т появляются через 3-6 мес. в незначительном титре. Используют р-цию иммуноферментного анализа. Если реакция положительна, ставится повторная. Затем проводится р-ция иммуноблодинг (пятно), которая совмещает разрешающую способность электрофореза и иммуноферментного анализа. Также применяется лабораторная диагностика на нахождение вирусного генома в поли

меразной цепной реакции. Профилактика. Только неспецифическая. Кровь для переливания должна обязательно тестироваться на содержание ВИЧ. Попытки создать вакцины, в том числе генноинженерия, производящиеся во всем мире пока успеха не имеют.

16 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика менингита. Методы диагностики: Основной метод диагностики – бактериологический: 1 – при подозрении на менингококконосительство мазок из носоглотки засевают петлей на сывороточный агар с добавлением ристомицина, который подавляет рост Гр+ флоры, затем ставят в термостат (37°С). При этом могут вырасти N. Meningitidis и нейсерии-резиденты (N. Catarrhalis). Выросшие изолированные колонии пересевают на скошен

ный сывороточный агар для получения чистой культуры. Затем проводят идентификацию: б/х – слабо активен, серодиагностика – по капсульным антигенам, ПЦР. Полученную культуру засевают на сывороточный агар при t +22° - вырастет N. Catarrhalis, на МПА – вырастет N. Catarrhalis и на сывороточный агар при t +37° - вырастет N. Meningitidis. 2 – при подозрении на менингококковую инфекцию центрифугируют спиномозговую жидкость, делают мазок ® если в мазке “чистые” лейкоциты (без менингококка),

то возникает подозрение, что они подверглись аутолизу. Тогда делают реакцию кольцепреципитации – в каждой пробирке находится сыворотка к определенной серогруппе; в какой пробирке реакция кольцепреципитации положительна Þ такой тип менингита у больного. Есливмазке менингококк находится в самом лейкоците и вне его, тогда засевают на сывороточнй агар при t 37°,. Выросшие колониипересеваютна скошенный сывороточный агар для получения чистой культуры. Затем проводят идентификацию:

б/х – слабо активен, серодиагностика – по капсульным антигенам. Иммунитет – стойкий, антимикробный, имеется “врожденная” устойчивость. Профилактика и лечение: профилактика – вакцинация – химическая вакцина, которая получена из капсульных полисахаридов типа А и С и обладают протективными св-вами. У детей до 2-3 лет антиген С не иммуногенен (не создает иммунологической памяти). Лечение – антибиотикотерапия.

18 Микробиологическая диагностика и профилактика гонореи. 11 Гонококк. Методы диагностики. Острая гонорея, ведущий метод – микроскопический. Из исследуемого материала делают два мазка, один окрашивают по Граму, другой – метиленовым синим. При наличии в мазке гонококков видны грам- диплококки, расположенныевнутрилейкоц итов (незавершенный фагоцитоз). При хронической гонорее гонококки нах вне клеток, и имеют атипичную форму в виде шаров или мелких образований. Поэтому для

диагностики хронической гонореи применяют серологический метод (РСК, РПГА), бактериологический метод. Бактериологическое исследование. Материал засевают на чашки Петри со специальными питательными средами — КДС, сывороточным агаром и др. Среда КДС содержит питательный агар с добавлением казеина, дрожжевого экстракта и сыворот­ки крови. Посевы инкубируют при 37 "С в атмосфере с повы­шенным содержанием СО2 (не менее 3 %) в течение 24—72 ч. Гонококки образуют круглые прозрачные

колонии, напоми­нающие капли росы. Подозрительные ко­лонии пересевают в пробирки на соответствующие среды для получения чистых культур, которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на средах "пестрого" ряда (полужид­кий агар с сывороткой и углеводом) или с помощью микро­тест-систем. Гонококки ферментируют только глюкозу с обра­зованием кислоты. Серологический диагноз ставят с помощью РСК. Реакция ставится для обнаружения антител в сыворотке крови больного, с помощью из

вестного антигена, которое представляет собой взвесь убитых гонококков.Учет результата реакции начинают с контрольных пробирок. При наличии гемолиза в контрольных пробирках, о результатах опыта судят по опытной пробирке.

20 Специфическая профилактика и терапия столбняка. Профилактика столбняка складывается из плановой и экстренной. 1 Плановая профилактика – всех детей с 3-х месячного возраста вакцинируют вакцинами: АДС, АКДС, Тетровак в состав которых входит столбнячный анатоксин (обезвреженный экзатоксин) – это активная профилактика (создается иммунологическая память). АДС – адсорбированный дифтерийный и столбнячный анатоксин. АКДС – адсорбированная коклюшно – дифтерийная столбнячная сы

воротка (убитые коклюшные палочки – против коклюша – аллергический компанент). Тетровак – убитые коклюшные палочки, дифтерийно - столбнячные анатоксины, вакцина против полиомиелита (убитая). Пентовак – добовляют вирус краснухи. Ревакцинация по каллендарному плану. 2 Экстренная профилактика – при травмах, ожогах, отморажениях. Она складывается: а) Активная профилактика – введение столбнячного адсорбированного анатоксина. б) Пассивная профилактика – введение ПСС (противо

столбнячная адсорбированная сыворотка) которая вводится дробно по Безредко в целях профилактики анафилактического шока. Диагностика. При стертой клинически не выраженной форме столбняка столбнячный анатоксин можно обнаружить в крови пациента с помощью биологического метода. Опытную мышь заражают смесью матерьяла + антитоксическая сыворотка. Контрольную мышь заражаем только исследуемым материалом (экзотаксин). Заражение проводят вблизи хвоста. Через 12-24 часа у контроль

ной мышки наблюдается сокращение околохвостовой мышцы и хвост торчит – начинается восходящий столбняк. У опытной мышки симптомов не наблюдается, за счет нейтрализации экзотоксина. Терапия: для лечения применяют противостолбнячную антитоксическую чыворотку или противостолбнячный иммуноглобулин человека.

10 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Холеры. Из материала (рвотные массы, фекалии, вода) делают экспресс-диагностику: 1 – ПЦР (наход чужеродную ДНК). 2 – РИФ (обраб материал О1 люминисцентной сывороткой). Из этого же материала – бактериологический метод: РИС. Идентификация: 1 – Подвижность в темном поле зрения. 2 – Биохимическая активность. 3 – О1-агглютинация и определение сероваров. 4 – Определение биоваров – чувствительны к

бактериофагам и к полимексину, способны склеивать куриные эритроциты. При отсутствии агглютинации можно разрушить капсулу из муцина нагреванием или использовать биологический метод (Исаева-Пфейффера) – выявление бактериолизинов. В брюшную полость морским свинкам вводят неизвестную бактериальную культуру. Одной свинке туда же вводят сыворотку. Затем из брюшной полости берут экссудат и в течении 1-2 часов смотрят в темном поле зрения. Сначала вибрион теряет

подвижность, затем лизируются, т.к у свинки много комплемента – идет реакция бактериолиза. Специфическая профилактика: 1 – Убитая вакцина Огава и Инаба. 2 – Живая авирулентная вакцина. 3 – Холероген анатоксин.

17 Морфологические культуральные и биохимические свойства гонококков. Факторы вирулентности. Вызывает гонорею и бленорею (поражение эпителия роговицы).Морфологич хар-ка: Гр- , бобовидной диплококк, окружены микрокапсулой, жгутиков не имеют, спор не образуют. Для гонококков хар-но наличие пили. Культуральные св-ва: требователен к культивированию. Он аэроб и требует наличие человеческого белка (чел сыворотка, асцитическая жидкость), лучше растут при содержании 5-10% СО2, из

углеводов ферментируют только глюкозу. Антигенные св-ва: неоднородные, антигенная структура гонококков изменчива. Факторы вирулентности: капсула, пили, s-IgA-протеаза, гиалуронидаза, эндотоксин, в кл стенки имеется белок I и II с которым связывают явление незавершенного фагоцитоза. Источник – больной с острой хронической формой. Путь передачи – половой. Иммунитет – антимикробный, типоспецифический, не стойкий. Профилактика – всем новорожденным закапывают в глаза 1% азотнокислое

серебро или сульфацил натрия. Взвесь убитых гонококков используют для вакцинотерапии хронической гонореи.

23 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Газовой гангрены. Факторы вирулентности. Возбудителями газовой гангрены являются Clostridium perfringens, Cl novyi,Clsepticum, Cl histolyticum. Морфологические свойства: Cl perfringens – Гр+ палочка, образует капсулу, жгутиков нет, образует субтерминальные споры. Cl novyi – Гр+ палочки, капсулы не образует, есть жгутики, образует терминальные или субтерминальные споры. Cl septicum и Cl

histolyticum – Гр+ палочка, капсулы не образует, есть жгутики, образует субтерминальные споры. Культуральные свойства: все 4 возбудителя культивируются на жидких и плотных питательных средах в анаэробных условиях. Cl perfringens образует круглые плоские колонии, Cl novyi – пушистый комок с уплотнением в центре, Cl septicum – колючки, Cl histolyticum – плотные зернышки. Биохимические свойства: Cl perfringens расщепляет гликоген с образованием СО2, Cl histolyticum имеет протеолитические

ферменты. Факторы вирулентности: Все 4 возбудителя имеют a-токсин, который обладает летальным,гемолитическим, некротическим свойствами.

26 Микробиологическая диагностика бруцеллеза. Острая стадия – (бак. метод) длится до 40 дней. Исследуемый матерьял: кровь, моча. Исследуемый матерьял > печеночный бульон > каждые 7 дней высевают на печеночный агар > ЧК > идентификация: 1приготовлен мазок. 2чувствительность к анилиновым красителям. 3биохимическая активность – выделение сероводорода (suis). 4р-ция агглютинации. Серологический метод становится положительным начиная с 10-15 дняболезни. Титр а/т уменьшается в процессе

выздоровления. Ставят р-цию агглютинации Райта Хеддельсона на стекле. Реакция Райта ставится при разведении сыворотки 1:100 – 1:800, диагностикумом Райта (смесь убитых 3-х видов бруцел). Реакция Райта положительна 1:800, человек болен бруцеллезом. При массовом обследование людей на заболевание ставим реакцию Хеддельсона с неразведенной сывороткой в разных объемах. Для того, чтобы реакция была видимой, диагностикум подкрашивают. При положительной пробе Хеддельсона, ставят реакцию

Райта.

19 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Столбняка. Факторы вирулентности. Возбудитель столбняка – Clostridiumtetani.Морфоло гические свойства: Гр+ палочка, перитрих, образует терминально расположенную круглую спору. Культуральные свойства: строгий анаэроб. При выращивании на жидких питательных средах продуцирует сильный экзотоксин. На плотных питательных средах формирует прозрачные или слегка сероватые колонии с шероховатой по

верхностью. Биохимические свойства: обладает слабыми протеолитическими свойствами, углеводов не расщепляет. Антигенная структура: по Н-антигену (жгутиковый) Сl. Tetani делят на 10 сероваров. О-антиген – общий для всего вида. Факторы вирулентности: основной фактор вирулентности – экзотоксин, состоящий из тетанолизина (вызывает гемолиз) и тетаноспазмина (поражает нервную систему).

21 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Ботулизма. Факторы вирулентности. Возбудитель – Clostridium botulinum. Морфологические свойства: Гр+ палочки, образуют субтерминально расположенные споры и имеют вид теннисной ракетки. Перитрихи, капсулы не образуют. Культуральные свйства: строгий анаэроб. Растет при температуре 25-35° при рН 7,2-7,4. На кровяном агареобразуетнебольшие прозрачные колонии, окруженные зоной гемолиза. В столбике сахар

ного агара колонии имеют вид пушинок или зерен чечевицы. Очень устойчива – выдерживает кипячение до 20 часов. Биохимические свойства: большой набор сахаролитических и протеолитических ферментов. Антигенные свойства: для идентификации важен экзотоксин; различают 7 сероваров возбудителя ботулизма (A,B,C,D,E,F,G), наиболее распространены A,B,Е. Факторы вирулентности: Экзотоксин, обладающий нейротоксическим и гемагглютинирующим действием.

24 Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и терапия Газовой гангрены. Диагноз газовой гангрены ставят на основании клиники. Ускоренная диагностика газовой гангрены: раневое отделяемое засевают на среды Китта-Тароцци, молоко и среду Вальсен-Блера. При наличии Clostridium perfringens через 6 часов молоко створаживается и сгусток разрывается. Среда Вальсен-Блера чернеет и разрывается из-за образования СО2. На среде Китта-Тароцци наблюдается помутнение и в

мазке определяют Гр+ палочки, расположенных попарно. Профилактика: правильная хирургическая обработка ран, соблюдение асептики и антисептики при операциях. Для активной иммунизации применяют анатоксины против газовой гангрены в составе секстанатоксина. Прививки проводят по специальным показаниям (военнослужащие). Терапия: антитоксическая сыворотка, которой обкалывают рану при являются Clostridium perfringens, Cl novyi иClsepticum..

25 Морфологические культуральные и биохимические свойства возбудителей бру­целлеза . Факторы вирулентности. Вовбудителями являются: 1 Brucella melitensis (источник мелкий рогатый скот). 2 B. bovis (крупный рогатый скот). 3 B. suis (источник свиньи). Морфологические свойства – это грам-, овоидные палочки. B. bovis микроаэрофил (требует наличия 10% СО2). Спор и капсул необразует и не имеет жгитиков. Больной чел для окружающих не заразен. Культуральные свойства: требовательна, рас

тет на печеночных и сывороточных средах (долго). Биохимические св-ва. Не образуют протеолитических ферментов, обладают слабой сахаролитической способностью. Вызывают гидролиз аминокислот, белков с образованием аммиака и сероводорода. Факторы вирулентости: факторы инвазивности, незавершенный фагоцитоз, гиалуронидаза, эндотоксин.

5 Морфологические, культуральные и биохимические свойства менингококков. Факторы вирулентности. 1 –Морфологические св-ва: Гр- диплококки, имеютбобовиднуюформу, вогнутыми поверх-ми обращены др к другу. Имеет пили и капсулу. 2 – Культуральные св-ва: аэроб, необычайно прихотлив (t – 36-38 C), на простых средах не растет; растет на сыворотке с добавлением белка, на селективной среде с ристомицином, б/х слабо активен. Повышенная концентрация СО2 (5-10%) стимулирует рост менинго

кокков. 3 – Антигенные св-ва: по капсульному полисахаридному антигену различают несколько серогрупп: А (чаще), В, С, Д… 4 – Факторы вирулентности: а – пили, б – s-IgA-протеаза – фермент, расщепляющий секреторный Ig, в – фермент инвазивности – гиалуронидаза, г – эндотоксин (липополисахарид клеточной стенки).

22 Диагностика и специфическая терапия Ботулизма. Для ботулизма характерна клиника, поэтому бактериологический метод используют редко. Применяют биологический метод: мышке вводят материал от больного вместе с сывороткой определенного типа. Какая мышка выжила – тот серотип Сl. Botulinum у больного. Для лечения вводят поливалентную сыворотку.

27 Характеристика неклостридиальных форм бактерий, возбудителей анаэробных процессов. Неклостридиальные анаэробы – это резиденты, которые могут вызывать различные воспалительные процессы. К ним относят: 1 – Bacteroides – Гр- палочки. Самая неприятная–Bacteroides fragilis – резистентна ко многим антибиотикам (пенициллину, цефалоспорину, канамицину). 2 – Fusobacterium – Гр-палочки;соединяясь с бактериями полости рта (спирохетами) вызывают язвенно-некротические поражения (ангина, стоматит).

3 – Пептострептококки – Гр+ палочки; вызывают гнойные процессы везде. 4 – Актиномицеты – Гр+ палочки; вызывают актиномикоз костей и мягких тканей.

КОККИ 4

1 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Дифтерии. Факторы вирулентности

2 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Дифтерии

3 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Туберкулеза. Факторы вирулентности

4 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Туберкулеза

5 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Сифилиса. Факторы вирулентности

6 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Сифилиса

7 Морфологические, культуральные, биохимические свойства Кишечной палочки. Роль кишечной палочки в инфекционной патологии у человека

8 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика кишечных заболеваний

9 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Холеры

10 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Холеры

11 Морфологические культуральные и биохимические свойства стафилококков. Факторы вирулентности

12 Микробиологическая диагностика и профилактика стфилококковых заболеваний

13 Морфологические культуральные и биохимические свойства стрептококков. Факторы вирулентности. (S. Mutans).

14 Микробиологическая диагностика и профилактика стрептококковых заболевании

15 Морфологические, культуральные и биохимические свойства менингококков. Факторы вирулентности

16 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика менингита

17 Морфологические культуральные и биохимические свойства гонококков. Факторы вирулентности

18 Микробиологическая диагностика и профилактика гонореи. 11 Гонококк. Методы диагностики

19 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Столбняка. Факторы вирулентности

20 Специфическая профилактика и терапия столбняка

21 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Ботулизма. Факторы вирулентности

22 Диагностика и специфическая терапия Ботулизма

23 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Газовой гангрены. Факторы вирулентности

24 Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и терапия Газовой гангрены

25 Морфологические культуральные и биохимические свойства возбудителей бру­целлеза . Факторы вирулентности

26 Микробиологическая диагностика бруцеллеза

27 Характеристика неклостридиальных форм бактерий, возбудителей анаэробных процессов

28 Возбудители гриппа, методы лабораторной диагностики. Антигенная изменчивость виpyca. Специфическая профилактика гриппа

29 Возбудителтг гепатита, методы лабораторной диагностики и специфической про­филактики гепатита

30 Возбудители СПИДа, методы диагностики и профилактики болезни

15 Способы стерилизации в микробиологии. I. Физические методы. Воздействие высоких темпе­ратур. Высокая температура обладает микробицидным действи­ем благодаря способности вызывать денатурацию белков. Стерилизация сухим жаром в сушилъно-стерилизационном шкафу (пени Пастера) основана на бактерицидном действии нагретого до 165—170 °С воздуха в течение 45 мин. Сухим жаром стерилизуют стеклянную посуду (чашки Петри, пробирки, пи­петки и др.). Автоклавирование — стерилизация перегре

тым водяным паром (при повышенном давлении) в паровом стерилизаторе (автоклаве). Многие питательные среды, перевязочный матери­ал, белье стерилизуют при давлении 1 атм в течение 15—20 мин, питательные среды с углеводами — при 0,5 атм в течение 15 мин, а обеззараживание инфицированного материала про­изводят при 1,5—2 атм в течение 20—25 мин. Стерилизация текучим паром осуществляется в автоклаве при незавинченной крышке и открытом выпускном кране. Данный способ стерилизации основан

на антибактериальном действии пара в отношении вегетативных клеток. Он приме­няется в тех случаях, когда стерилизуемый материал не выдер­живает высокой температуры, например питательные среды с витаминами, углеводами. Тиндализация — это дробная стерилизация материалов при 56—58 °С в течение 1 ч 5—6 дней подряд. Применяется для стерилизации легко разрушающихся при высокой температуре веществ (сыворотка крови, витамины и др.). Прокаливание в пламени спиртовки или газовой горелки приме

няют ограниченно, например для стерилизации бактериоло­гических петель, игл, пинцетов. Воздействие ионизирующих излучений. Микробицидное действие ионизирующих излучений основано на их способности вызывать повреждения в молекуле ДНК. Для сте­рилизации одноразовых медицинских инструментов и бактери­ологического оборудования, обычно применяют стерилизацию гамма-излучением. II. Механические методы. Основаны на фильтровании через специальные мембранные фильтры с малым размером

пор, способные механически задерживать микроорганизмы. В лабо­раторной практике широко применяют бумажные и полимер­ные фильтры. Фильтрование ис­пользуют для стерилизации жидких материалов, не выдержива­ющих нагревания (сыворотка крови, растворы антимикробных препаратов, компоненты питательных сред для бактерий и культур клеток), для получения бактериальных токсинов и других продуктов жизнедеятельности бактерий. III. Химические методы. Основаны на обработке объекта химически

ми веществами и способными обеспечить полное уничтожение микрофлоры. Хи­мическую стерилизацию обычно применяют для обработки различных приборов и инструментов многоразового использо­вания, чувствительных к высоким температурам (фиброоптические приборы, медицинские имплантаты и др.).

30 Полимеразоцепная реакция (ПЦР), ИФА. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) -основаннана принципе многократного копирования (амплификации) определенного участка ДНК или РНК. ПЦР позволяет выявить малые фрагменты ДНК, характерные для определенного вида микробов, и точно идентифицировать этот вид. Постановка ПЦР включает следующие этапы: 1. Выделение ДНК (РНК) из исследуемого материала. Для этого клетки необходимо лизировать с помощью высокой температуры. Затем отде

лить ДНК от клеточных обломков и разрушить клеточные нуклеазы. 2. Копирование выделенных участков (копий) нуклеиновых к-от 1. В результате нагревания до 94 -95°С двойная цепь ДНК разделяется на две отдельные цепи. 2. К одноцепочечной ДНК присоединяется праймер. Праймер - это последовательность из 15 - 30 нуклеотидов, комплементарная маркерному фрагменту ДНК (т. е., тому фрагменту, который есть только у определяемого возбудителя заболевания). З.Синтез (элонгация) -достраивание

второй цепи ДНК. ДНК-полимераза присоединяет нуклеотиды к праймерам, достраивая двухцепочечные фрагменты ДНК ( при 72°С). Вновь синтезированные фрагменты ДНК служат матрицей для синтеза новых цепей в следующем цикле амплификации - это и есть цепная реакция в ПЦР. 3. Определение (детекция) продуктов ПЦР чаще всего проводят при помощи электрофореза. В ре­зультате видна оранжевая полоска на уровне контрольной ДНК. Иммуноферментный анализ (ИФА) — основан на использовании

двух разных по специфич­ности моноклональных антител против двух разных антиген­ных эпитопов в составе искомого антигена. В лунки с иммо­билизованными антителами против одного эпитопа добавляют материал, в котором ищут антиген. В процессе инкубации на твердой фазе образуется комплекс антиген—антитело. Затем лунки отмывают от несвязавшихся компонентов и добавляют меченные ферментом антитела против другого эпитопа того же антигена. После повторной инкубации и отмывания от избыт­

ка конъюгата антител с ферментом определяют количество свя­завшихся антител по их ферментативной активности в присутст­вии субстрата с индикатором. На стадии выявления иммунного комплекса антиген оказы­вается как бы зажатым между молекулами иммобилизированных и меченых антител, что послужило поводом для широко рас­пространенного в литературе названия "сэндвич"-метод .

5 Способы культивирования вирусов. Методы культивирования вирусов. Для культивирования ви­русов используют культуры клеток, куриные эмбрионы и чув­ствительных лабораторных животных. Культуры клеток. Представляют собой соматические или эмбриональные клетки животных или человека, культиви­руемые в лабораторных условиях. В культурах клеток удается культивировать большинство вирусов, вызывающих заболевания человека.Внутриклеточные паразиты оказывают цитопатическое дей­ствие (ЦПД)

на клетки, в которых происходит их репродукция. ЦПД может проявляться деструкцией (лизисом) зараженных клеток, изменением их морфологии (изменением размеров и формы самой клетки, клеточного ядра, появлением вакуолей или включений) и нарушением их функций. Куриные эмбрионы. Пригодны для культивирования хламидии, риккетсии и некоторых вирусов, патогенных для человека. Для получения чистых культур риккетсии, хламидии и ряда вирусов в диагностических целях исполь­зуют 8—12-

дневные куриные эмбрионы. К недостаткам данно­го метода относятся невозможность обнаружения исследуемого микроорганизма без предварительного вскрытия эмбриона. Для заражения куриных эмбрионов исследуемый материал вводят в аллантоисную и амниотическую полости в желточный мешок куриного эмбриона. Лабораторные животные. Видовая чувствительность животных, их возраст определяют репродуктивную способ­ность вирусов. Преимущество метода культивирования вирусов в ор­ганизме лабо

раторных животных перед другими состоит в воз­можности выделения тех вирусов, которые плохо репродуци­руются в культуре клеток или эмбрионе. К его недостаткам относятся высокая вероятность контаминации организма по­допытных животных посторонними вирусами.

6 Сущность и этапы бактериологичегого метода исследования. Бактериологический метод – это выделение чистой культуры микробов из исследуемого материала и ее идентификация. Этапы. I этап – выделение чистой культуры. 1-ый день. Исследуемый материал: а) ориентировочная микроскопия по Граму. б) плотная МПА (37С, 24часа). Цель 1-го дня: получить изолированные колонии. Колония – потомство одной клетки выращенное на плотной питательной среде. 2-ой день. 1. Макроскопическая хар-ка колоний. Парамет

ры: цвет, форма, размер, хар-р краев, хар-р поверхности, консистенция (крошковидная, плотная, слизистая, кородирующая). 2. Микроскопическая хар-ка. Из намеченной колонии приготовлен мазок, окрашен по Граму. 3. Из намеченной колонии делают посев на скошенный агар для получения ЧК (37С, 24часа). II этап – идентификация выделенной культуры. 3-ий день I. Идентификация: 1. Проверка чистоты выделенной культуры. Приготовлен мазок, окрашен по Граму (морфологические свойства). 2. Определение био

химической активности: ферментация углеводов и белков (культуральные свойства). 3. Сероидентификация (по а/г). 4. Факторы вирулентности (вирулентность – степень болезнетворности микроба обуслевленная факторами инвазивности и токсичности). 5. Фаготипирования ( определение чувствительности бактерий к бактериофагу, который вызывает лизис этой культуры.) II. Определение чувствительности к антибиотикам. 4-тый день. Учет результатов: 1 Определение вида по биохимической активности. 2 Определение

чувствительности исследуемой культуры к антибиотикам.

20 Варианты постановки реакции агглютинации. Реакция агглютинации (серологическая реакция) – склеивание клеток под действием а/т в присутствие электролита. Специфический фактор: 1. А/г – взвесь клеток (эритроциты, убитые и живые микробы). 2. А/т – агглютинирующая сыворотка (иммунизируют кролика взвесью соответствующих клеток). Неспецифический фактор – 3. 0,85% NaCl – электролит который делает реакцию видимой. С помощью реакции агглютинации можно определить неизвестный вид микроба

– сероидентификация, или выявить титр (количество) а/т – серодиагностика. Варианты постановки - 1 Реакция агглютинации на стекле – ставится с одним развидением диагностической агглютинирующей сыворотке, которая в зависимости от ее титра составляет 1:10, 1:25, 1:50, или 1:100. Предметное стекло делят на квадраты. В один из них наносят каплю NаСl, в другой каплю сыворотки. Затем петлей в каждую каплю вносят бактериальные культуры и перемешиваю до равномерной взвеси. Далее наблюдают за появлением

зерен и хлопьев агглютината (этим самым мы определяем видовую принадлежность). Учет через 3-5 мин. Для определения серовара необходимо поставить р-цию агглютинации с типоспецифическими сыворотками. 2. При постановки развернутой реакции агглютинации определяем титр а/т (это максимальное разведение, в котором обнаруживается агглютинация а/г), у пациента с целью диагностики заболевания. Диагностический титр при брюшном тифе 1:200. Реакция агглютинации положительна при титре 1:100. Для

уточнения диагноза необходимо поставить повторную реакцию через 5 дней.

4 Способы микроскопического изучения вирусов. 1 Электронная микроскопия позволяет изучить закономерности взаимодействия вируса и клетки, этапы морфогенеза вирусов в процесси репродукции. 2 Метод напыления металлами применяют для получения контрасных препаратов. Метод создает объемность изображения, позволяет хорошо изучить форму и величину вирусов, строение их поверхности, но внутренняя структура вируса недоступна. 3 Световая микроскопия, используется для изучения окрашенных объ

ектов в фиксированных препаратах. 4 Темнопольная микроскопия применяют для прижизненного изучения микробов в нативных неокрашенных препаратах. 5 Фазово - контрастная микроскопия предназначена для изучения нативных препаратов. Фазово – контрастная приспособление дает возможность увидить прозрачные объекты. 6 Люминесцентная (или флюоресцентная) микроскопия возникает в результате окрашивания препаратов специальными люминесцирующими красителями – флюорохромами. Этот

метод позволяет исследовать живые микробы. 7 Электронная микроскопия. Позволяет наблюдать объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности светового микроскопа. Применяют для изучения вирусов, тонкого строения различных микроорганизмов.

19 Способы культивирования анаэробов. Все ма­нипуляции с анаэробами осуществлятся в бескислородных условиях. Для этого используют герметичные камеры с газовым составом среды. Посевы производят на специальные обогатительные (электив­ные) среды для анаэробов (тиогликолевую, Китта—Тароцци). Посевы инкубируют в специальных СО2-инкубаторах или в анаэростатах, которые помещают в обычный термостат. Для инкубации небольших по объему посевов (1—2 чашки Петри) приме-

няют пластиковые пакеты, содержащие газовую смесь, которая обеспечивает полное удаление кислорода из воздуш­ной среды в течение нескольких минут.

29 Постановка и использование, реакции торможения гемагглютинации. РТГА (р-ция торможения гемагглютинации) является вариантом р-ции нейтрализации вируса. Она основана на способности противовирусной антисыворотки подавлять вирисную гемагглютинацию эритроцитов определенных видов животных (кур, гусей и др.). Это объясняется способностью специфических антисывороток нейтрализовать вируные гемагглютинины, т.е проводят типирование вируса в РТГА с набором типоспецифических сыво

роток. РТГА широко применяется для идентификации и типирования вирусов, а также для выявления антигемагглютининов в сыворотке крови исследуемых людей.

18 Метод культуры ткани. Для выделения чистой культуры вируса из иследуемого материала применяют различные типы однослойных клеточных культур, а также куриные эмбрионы. Идентификацию вируса производят по ЦПД (появление гигантских многоядерных клеток). Характерное появление очагов избыточного роста клеток, приводит к образованию бляшек, изменению формы клеток с последующей дегенерацией и слущиванием монослоя. В зараженных клетках выявляются характерные включения. При за

рожении куриных эмбрионов, в положительном случае через 3-е суток наблюдается появление характерных белесоватых, непрозрачных выпуклых бляшек. Бляшка – это как бы колонии вирусов, которые вызвали гибель клетки. Сосчитав количество бляшек, можно определить количество вируса в материале. БОЕ (бляшко – образующее единица) используется для определения количества вируса в вакцине. Для выявления вируса также применяется цветная проба. Если в культуре клетки произошла репродукция вируса, то рН

среды не меняется, т.к клетки погибли, и цвет среды не меняется.. Если репродукция не произошла, клетки живы выделяют метаболиты и изменяется рН. Для идентификации используют методы РТГА, ИФА позволяющие обнаружит вирусные а/г в зараженной культуре.

23 Методика постановки реакции связывания комплемента. РСК идет в 2-ух р-циях: 1.Р-ция гемолиза – это р-ция растворение эритроцитов при взаимодействии с гемолизинами (а/т) в присутствии комплемента. Компаненты: 1 а/г (эритроциты барана) 2. а/т – гемолитическая сыворотка (кролика иммунизируют бараними эритроцитами) 3. Комплемент (сыворотка морской свинки). Комплемент делает р-цию видимой т.е делает гемолиз. 2. Р-ция лизиса – растворение клеток при взаимодействии с а/т в присутствии ком

племента (причиной лизиса явл-ся комплемент) в его активации и образовании МАК. Р-ция гемолиза используется как индикатор свободного или связанного комплемента в РСК. В контроле комплемент всегда свободен, т.к отсутствует образование комплекса а/г+ а/т т.е в пробирках “лаковая кровь” (гемолиз+). Если идет р-ция лизиса т.е нет гемолиза - РСК+, то человек болен. Если идет р-ция гемолиза (гемолиз+) – РСК-, то человек здоров. Результат р-ции зависит от кол-ва комплемента. Исследуемую сыворотку необ

ходимо подогреть при t 56С – 30мин для иноктивации (разрушения). Комплемент (сыворотка) берут в строго определенном кол-ве – в рабочей дозе – это титр увеличенный на 25%. Титр – это минимальное кол-во комплемента необходимое для гемолиза. РСК используют при диагностике вирусных инфекций, бруцилезе, р-ция Вассермана.

1 Способы приготовления мазков для микроскопии. Техника приготовления мазков. Мазки готовят на обезжиренных предметных стеклах, предварительно обрисовав карандашом по стеклу место будущего мазка с противоположной стороны предметного стекла. При росте бактерий на жидкой питательной среде, материал берут стерильной бактериальной петлей, наносят на стекло и растирают над очерченной площадкой. В случае роста бактерии на плотной питательной среде, на предметное стекло предвари

тельно наносят спичкой каплю воды и материал растирают рядом с каплей посуху, а затем вносят петлей воду, постепенно готовя однородную взвесь. Бактериальную петлю перед использованием и с оставшейся культурой стерилизуют в пламени горелки: Приготовленный мазок высушивают на воздухе или держа высоко над пламенем спиртовки. После этого препарат фиксируют, для чего мазок стороной, где нет материала, троекратно проводят через середину пламени горелки. Фиксация позволяет убить микробы, прикре

пить их к стеклу и, наконец убитые микробы окрашиваются лучше, чем живые.

22 Методика постановки реакции бактериолиза. Реакция бактериолиза — растворение бактерий в присут­ствии специфических антител — бактериолизинов и компле­мента. Иммунный лизис бактерий можно наблюдать как в организме животного, так и в пробирке. Ингредиенты реакции: живые бактерии, специфические по отношению к ним антитела (им­мунная сыворотка или иммунизированное животное), компле­мент. Как защитная реакция бактериолиз наиболее выражен при холере, сальмонеллезных инфекци

ях. Многие виды бакте­рий не способны к лизису, поэтому реакция бактериолиза применяется редко. Постановка реакции бактериолиза in vitro: в опытную пробирку вносят взвесь живых бактерий, специфическую иммунную сыворотку и комплемент, в контрольную пробирку — те же бактерии, нормальную сыворотку (без антител) и комплемент. После двухчасового выдерживания пробирок в тер­мостате при 37°С из каждой пробирки делают высевы по 0,1 мл на чашки Петри с мясопептонным агаром. Опыт учи

тываю; после суточной инкубации: на чашке с высевом из опытной про­бирки колоний должно быть значительно меньше, чем а конт­роле.

21 Варианты постановки реакции преципитации. Реакция преципитации (серологическая р-ция) – это осаждение а/г из раствора в присутствии электролита. Компаненты: 1. А/г в коллойдном состояние (экстракт из клеток, моллекулы белка, полисахариды). 2. А/т – преципитирующаяся сыворотка (экстракт из клеток или отдельными а/г ). 3. Электралит 0,9% NаСl (чтобы реакция стала видимой ). Реакция сверхчувствительная и позволяет определить следы а/г или а/т. Варианты постановки:1 Реакция кольцепреципитация –

при положительной реакции на границе между сывороткой (а/т) и а/г появляется преципитат в виде белого кольца. 2 Реакция преципитации в геле – чашки заливают агаром, в котором вырезают несколько лунок. В центральную лунку вносят сыворотку содержащую а/т, а в остальные различные а/г. При диффузии реагентов в агаре, на месте встречи а/г и а/т образуются мутные полосы – усы преципитации. 3 Реакция термоприципитации – основана на термостабильности а/г, который получают путем кипячения (сибирская

язва, чума).

26 Способы определения токсигенности культур. Определени токсигенности имеет важное значени при диагностике дифтерии. Токсигенность (способность к продукции дифтерийного токсина) определяют с помощью различных серологических реакций. Оп­ределение токсигенности – реакция преципитации в агаре с антитоксической противодифтерийной сывороткой: в чашку Петри с агаром, содержащим лошадиную сыворотку, мальтозу и цистин, кладут полоску фильтровальной бумаги, пропитанную анти­

токсической противодифтерийной сывороткой. Затем засевают исследуемые культуры в виде перпендикулярных к бумаге штрихов. В качестве контроля используют заведомо токсигенную куль­туру. Посевы инкубируют при 37"С до следующего дня. При размножении токсигенной культуры в месте соединения ток­сина с антитоксическими антителами образуется преципитат в виде белых линий - "усов".

25 Состав и цели использования минимальной среды. Минемальная среда – это питательная среда содержащая минеральные соли, источники углерода и азота, но не содержащая ростовых факторов. Прототрофы – это микробы, которые из глюкозы и солей амония могут синтезировать себе необходимые вещества. Ауксатрофы – они не могут синтезировать из глюкозы и солей амония необходимые вещества, т.е микроб нуждается в определенных веществах, которые он сам синтезировать не может – это фактор

роста. Ауксотрофные штамы в отличии от прототрофных на минимальных средах не растут. Цель – используют в генетики. В генетики этот способ был выделен при коньюгации (передача генетической информации от донора к реципиенту при непосредственном контакте клеток) и трансдукции (передача фрагмента двунитчатой ДНК от донора к реципиенту с помощью мутанта умеренного фага).

28 Постановка и использование реакции пассивной гемагглютинации. РПГА по сравнению с р-цией агглютинации, обладает более высокой чувствительностью, т.е можно опредилить низкий титр а/т или а/г. Постановка. В лунки с исследуемым материалом вносят одинаковый объем 3% суспензии нагруженных а/т эритроцитов. Через 2 часа инкубации при t 37 учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов. Выпадение эритроцитов в осадок в виде зонтика (положительная р-ция). При отрицательной

р-ции в лунках видны пуговки. Р-ция а/г + а/т происходит на пов-ти эритроцита (глазу невидно), но образуются крупные комплексы эритроцитов, которые выпадают в осадок. Ее используют для идентификации возбудителя по его антигенной структуре или для идентификации токсинов в исследуемом материале.

27 Постановка и использование реакции гемагглютинации. РПГА по сравнению с р-цией агглютинации, обладает более высокой чувствительностью, т.е можно опредилить низкий титр а/т или а/г. Постановка. В лунки с исследуемым материалом вносят одинаковый объем 3% суспензии нагруженных а/т эритроцитов. Через 2 часа инкубации при t 37 учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов. Выпадение эритроцитов в осадок в виде зонтика (положительная р-ция). При отрицательной р-ции в лун

ках видны пуговки. Р-ция а/г + а/т происходит на пов-ти эритроцита (глазу невидно), но образуются крупные комплексы эритроцитов, которые выпадают в осадок. Ее используют для идентификации возбудителя по его антигенной структуре или для идентификации токсинов в исследуемом материале.

ОКРАСКИ И РЕАКЦИИ 5

1 Способы приготовления мазков для микроскопии

2 Способы приготовления препаратов для изучения подвижности микробов

3 Принцип иммунолюминесцентного исследования материала

4 Способы микроскопического изучения вирусов

5 Способы культивирования вирусов

6 Сущность и этапы бактериологичегого метода исследования

7 Методика получения чистой культуры

8 Способы идентификации выделенной культуры

9 Способы определения чувствительности выделенной культуры к антибиотикам

10 Метод окраски препаратов ио Граму

11 Механизм окраски микробоя по Граму

12 Метод окраски препаратов по Цилю-Нильсеиу

13 Способы определения наличия у бактерий капсулы

14 Способы определения наличия у бактерии спор

15 Способы стерилизации в микробиологии

16 Способы стерилизации лабораторкой посуды

17 Способы стерилизации питательных сред

18 Метод культуры ткани

19 Способы культивирования анаэробов

20 Варианты постановки реакции агглютинации

21 Варианты постановки реакции преципитации

22 Методика постановки реакции бактериолиза

23 Методика постановки реакции связывания комплемента

24 Способ получения и цель применения гемолитической сыворотки

25 Состав и цели использования минимальной среды

26 Способы определения токсигенности культур

27 Постановка и использование реакции гемагглютинации

28 Постановка и использование реакции пассивной гемагглютинации

29 Постановка и использование, реакции торможения гемагглютинации

30 Полимеразоцепная реакция (ПЦР), ИФА

7 Методика получения чистой культуры. Выделение чистой культуры. 1-ый день. Исследуемый материал: а) ориентировочная микроскопия по Граму. б) плотная МПА (37С, 24часа). Цель 1-го дня: получить изолированные колонии. Колония – потомство одной клетки выращенное на плотной питательной среде. 2-ой день. 1. Макроскопическая хар-ка колоний. Параметры: цвет, форма, размер, хар-р краев, хар-р поверхности, консистенция (крошковидная, плотная, слизистая, кородирующая). 2. Микроскопическая

хар-ка. Из намеченной колонии приготовлен мазок, окрашен по Граму. 3. Из намеченной колонии делают посев на скошенный агар для получения ЧК (37С, 24часа).

8 Способы идентификации выделенной культуры. Идентификация: 1. Проверка чистоты выделенной культуры. Приготовлен мазок, окрашен по Граму (морфологические свойства). 2. Определение биохимической активности: ферментация углеводов с образованием к-ты и газа, и белков с образованием индола (культуральные свойства). 3. Сероидентификация (определение а/г у микроба с помощью известных иммунных сывороток т.е известные а/т). 4. Факторы вирулентности (вирулентность – степень болезнетворности

микроба обуслевленная факторами инвазивности и токсичности). 5. Фаготипирования ( определение чувствительности бактерий к бактериофагу, который вызывает лизис этой культуры.)

17 Способы стерилизации питательных сред. Автоклавирование — стерилизация перегретым водяным паром (при повышенном давлении) в паровом стерилизаторе (автоклаве). Многие питательные среды стерилизуют при давлении 1 атм в течение 15—20 мин, питательные среды с углеводами — при 0,5 атм в течение 15 мин. Стерилизация текучим паром осуществляется в автоклаве при незавинченной крышке и открытом выпускном кране. Данный способ стерилизации основан на антибактериальном действии пара в отно

шении вегетативных клеток. Он приме­няется в тех случаях, когда стерилизуемый материал не выдер­живает высокой температуры, например питательные среды с витаминами, углеводами.

16 Способы стерилизации лабораторкой посуды. Сушильно-стерилизационный шкаф (печь Пастера). Пред­назначен для суховоздушной стерилизации стеклянной лабо­раторной посуды и других жаростойких материалов (чашки Петри, пробирки, пи­петки и др.). Терми­ческая стерилизация предметов - обработка насыщенным водяным паром под давлением. Паровой стерилизации подвергают изделия из текстиля (белье, вату, бинты, шовный материал), из резины, стекла, некоторых полимерных материалов, питательные

среды, лекарственные препараты.

9 Способы определения чувствительности выделенной культуры к антибиотикам. Наиболее простым является метод бумажных дисков. Последние представляют собой небольшие кружки фильтровальной бумаги, пропитанные определённым количеством антибиотика. Диски, пропитанные различными антибиотиками, помещают на ча­шки с МПА, где сделан сплошной посев исследуемой культуры в виде смыва. Степень чувствительности к антибиотикам определя­ют после инкубации в термостате (сутки) по вели

чине зоны задержки роста вокруг каждого диска.

11 Механизм окраски микробоя по Граму. В результате фиксации огнем, несколько нарушается структура поверхностной стенки. У Грам+ разрушаются 2-3 слоя пептидогликана (ПГ), и изоставшихся слоев спирт за 30 сек. неуспевает вымыть генцианвиолет, и они остаются окрашены в синий цвет. Если воздействовать спиртом 2-3, то Грам+ можно обесцветить. Грам- стенка в результате фиксации огнем, становится более рыхлой, а спирт является жирорастворителем. Он вымывает краску за 30сек., и поэтому их докрашивают

фуксином (красный цвет).

14 Способы определения наличия у бактерии спор. Окраска по Ожешко – сначала разрыхляют оболочку НСl, нагревают, а затем окрашивают по методу Циля-Нильсена (промыть мазок водой > нанести 5% р-р серной к-ты на 1-2 мин. для обесцвечивания > промыть водой > докрасить мазок водным р-ром метиленового синего в течении 3-5 минут > промыть водой, высушить). Спора окрашивается в красный цвет.

2 Способы приготовления препаратов для изучения подвижности микробов. Косвенный метод выявления – подвижность бактерий определяют в живом состоянии, в темном поле зрения, в раздавленной или висячей капле. За подвижность отвечают жгутики.

3 Принцип иммунолюминесцентного исследования материала.. Основан на соединении а/г со специфическими а/т, мечеными флюорохромными красителями. Он используется в качестве диагностического экспресс – метода при многих вирусных инфекциях.

10 Метод окраски препаратов ио Граму. На фиксированный мазок кладут кусочек фильтр. бумаги и наливают р-р генцианвиолета на 1-2 мин->снимают бумажку, сливают краску и наливают р-р Люголя на 1 мин(мазок чернеет)->сливают Люголь и действуют спиртом в теч. ½-1 мин->промывают водой->доп. окрашивают фуксином на 1-2 мин(красный)

13 Способы определения наличия у бактерий капсулы. 1. Окраска по Бурри-Гинсу, капсула не окрашивается. 2. Окраска по Граму – окрашивается слабо. 3. Феномен набухания капсулы под действием антител. 4. Иммунолюменисцентный метод.

24 Способ получения и цель применения гемолитической сыворотки. Получают путем иммунизации кролика бараньими эритрацитами. Барану вводят а/г > берут у него кровь и иммунизируют кролика. Применяют в РСК.

12 Метод окраски препаратов по Цилю-Нильсеиу. На фиксированный мазок кладут кусочек фильтр. бумаги, наливают р-р фуксина и подогревают 3-5мин. до появления паров > снять бумагу промыть мазок водой > нанести 5% р-р серной к-ты на 1-2 мин. для обесцвечивания > промыть водой > докрасить мазок водным р-ром метиленового синего в течении 3-5 минут > промыть водой, высушить.

14 Общая характеристика механизмов изменчивости вирусов. Интегративный тип взаимодействия (вирогения) характеризует­ся встраиванием нуклеиновой кислоты вируса в хромосому клетки. Идет изменение генома вируса, т.е. мутации. ДНК вируса, находящаяся в составе хромосомы клетки, назы­вается ДНК-провирусом. При делении клетки, ДНК-провирус несет дополнительную генетическую инфор­мацию, в результате чего клетки приобретают ряд новых свойств. Так, встраивание может явиться причиной

возникновения ряда аутоиммунных и хронических заболеваний, разнообразных опу­холей. При внедрение ретровирусов в рибосомах образуются вирусные белки, сборка и почкование и вирус выходит захватив с собой компоненты клетки, в том числе компоненты клеточной мембраны, что подавляет иммунитет. Идет изменение генома вируса, т.е. мутации. Умеренные фаги (вирус) вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае гено­мом фага называют профаг. Био­

логическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизогенией, а культура бакте­рий, содержащая профаг, называется лизогенной. Изменение свойств мик­роорганизмов под влиянием профага называется фаго­вой конверсии. Фаги учавствуют в рекомбинативной форме изменчивости – трансдукции. Трансдукция — передача ДНК от бактерии-донора к бактерии-реципиенту при участии бактериофага. Умеренные фаги являются мощным фак­тором изменчивости микроорганиз

мов (кульиуральные св-ва, биохимических, токсигеных, антигенных). В основе изменчивости ви­русов лежат мутации. Присутствие нескольких типов вирусов в инфици­рованных клетках, т.е. смешанная инфекция, может приводить к мно­жественной реактивации, рекомбинации, кросс-реактивация; могут и негенетические взаимодействия — компле­ментация. Множественная реактивация — процесс взаимодей­ствия вирусов с поражением разных генов, в результате кото­рого взаимодействующие вирионы допол

няют друг друга благо­даря генетической рекомбинации, образуя неповрежденный ви­рус. Рекомбинация — обмен генетическим материалом меж­ду вирусами — возможна в виде обмена генами (межгенная ре­комбинация) или участками одного и того же гена (внутригенная рекомбинация). Негенетического взаимодействия вирусов может быть приведена комплементация: при смешанной ин­фекции стимулируется репродукция обоих участников взаимодей­ствия или одного из них без изменения генотипов виру

сов. Обмен генетическим материалом при этом не наблю­дается. Если геном одного вируса заключен в капсид другого виру­са, этот феномен называется фенотипическим смешива­нием, наблюдаемым при смешанной инфекции. Действие вирусов на клетку может привести: 1- трансформация клетки в злокачественную; 2- пролиферация (бородавки) идёт просто размножение; 3- изменение функциональной активности клетки; 4- изменение АГ свойств (клетка становится аутоантигеном); 5- выход дефектного вируса (ню).

1 Структура и принципы классификации бактериофагов. Бактериофаги (пожиратель) — вирусы бактерий, обладающие способностью специфически про­никать в бактериальные клетки, репродуцироваться в них и вы­зывать их растворение (лизис). Морфология. Имеет двунитчатую ДНК с сокращаюмщимся отростком. Форма зависит от типа симметрии капсомера. Если кубический–то форма многогранника, если по спирали то форма палочковидная. Имеют форму головастика или сперматозоида, кубическую и нитевид

ную формы. Имеющие форму сперматозоида состоят из вытянутой икосаэдрической головки и хвостового отростка . Внутри хвостового отростка имеется полый цилиндрический стержень, сообщающийся отверстием с головкой, снаружи — чехол, способный к сокращению наподо­бие мышцы. Хвостовой отросток заканчивается шестиугольной базальной пластинкой с короткими шипами, от которых отхо­дят нитевидные структуры — фибриллы. Химический состав . нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК) и белка. У фагов,

имеющих форму сперматозоида, двунитчатая ДНК упакована в виде спирали внутри головки. Белки входят в состав оболочки (капсида), окружающей нуклеиновую кислоту, и во все структурные элементы хвостового отро­стка. Обнаружены внутренние (геномные) белки, связанные с нуклеиновой кис­лотой, и белки-ферменты (лизоцим, АТФ-аза), участвующие во взаимодействии фага с клеткой. Резистентность.Ряд дезинфицирую­щих веществ (фенол, этиловый спирт, эфир и хлороформ) не оказывают существенного

влияния на фаги. Высокочувствитель­ны к формалину и кислотам. Инактивация наступает при температуре 65—70 °С, сохраняются при высушивании в запаянных ампулах, заморажи­вании при температуре —185 °С в глицерине. По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги. При попадании в бактерию по своему взаимодействию могут быть вирулентными ,т.е. попав в клетку идет репродукция вируса и лизис бактерии. Некоторые фаги попав в бактерию не репродуцируются в ней, не вызывая

ее лизиса, а их ДНК включается в бактериальную хромосому это называется профаг. А сам фаг назыв. умеренным. А это явление ( биологический симбиоз микробной клетки с умеренным фогом (профагом) назыв. Лизогения, а культура бактерий , содержещий профаг, назыв. лизогенной. Лизогения это когда под действием внеш. факторов профаг выходит из интегрированного состояния и превращается в вирулентный ,т.е. идет репродукция фаговых частиц и лизис. Фаг включается в ДНК (нуклеотид) и может взять

кусок ДНК и передать другому – фаговая конверсия ( мощный фактор изменчивости микроорганизмов). По специфичнос­ти действия различают поливалентные фаги, способные взаимодействовать с родственными видами бактерий, моновалентные фаги, взаимодействующие с бактериями определенного вида, и типовые фаги, взаимодействующие с отдельными вариантами (типами) данного вида бактерий.

2 Механизм взаимодействия бактериофагов с клеткой. По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги. Ви­рулентные фаги, проникнув в бактериальную клетку, авто­номно репродуцируются в ней и вызывают лизис бактерий. Эти фаги адсорбируются на по­верхности бактериальной клетки с помощью фибрилл хвостово­го отростка. В результате активации фагового фермента АТФазы происходит сокращение чехла хвостового отростка и внедрение стержня в клетку. В процессе “прокалыва

ния” клеточной стенки бактерии принимает участие фермент лизоцим, находящийся на конце хвостового отростка. Вслед за этим ДНК фага, содержаща­яся в головке, проходит через полость хвостового стержня и ак­тивно впрыскивается в цитоплазму клетки. Остальные структур­ные элементы фага (капсид и отросток) остаются вне клетки. После биосинтеза фаговых компонентов и их самосборки в бактериальной клетке накапливается до 200 новых фаговых ча­стиц. Под действием фагового лизоцима и внутриклеточного

ос­мотического давления происходит разрушение клеточной стен­ки, выход фагового потомства в окружающую среду и лизис бактерии. Один литический цикл (от момента адсорбции фагов до их выхода из клетки) продолжается 30—40 мин. По специфичнос­ти действия различают поливалентные фаги, способные взаимодействовать с родственными видами бактерий, моновалентные фаги, взаимодействующие с бактериями определенного вида, и типовые фаги, взаимодействующие с отдельными вариантами (типа

ми) данного вида бактерий. Умеренные фаги лизируют не все клетки в популяции, с частью из них они вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае гено­мом фага называют профаг. Профаг, не вызывая ее лизиса, передается по наслед­ству от клетки к клетке. Био­логическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизогенией, а культура бакте­рий, содержащая профаг, получила название лизогенной. Это отражает способ

ность профага самопроизвольно или под действи­ем ряда физических и химических факторов исключаться из хро­мосомы клетки и переходить в цитоплазму, т. е. вести себя как вирулентный фаг, лизирующий бактерии. Лизогенные культуры невосприимчивы к повторному заражению близкородственным фагом и приобретают дополнительные свойства, которые находятся под контролем генов профага. Изменение свойств мик­роорганизмов под влиянием профага получило название фаго­вой конверсии и касается

различных их свойств: культуральных, биохимических, токсигенных, антигенных, чувствительности к антибиотикам и др. Кроме того, переходя из интегрированного состояния в вирулентную форму, умеренный фаг может захва­тить часть хромосомы клетки и при лизисе последней перено­сит эту часть хромосомы в другую клетку. Если микробная клет­ка станет лизогенной, она приобретает новые свойства. Таким образом, умеренные фаги являются мощным фак­тором изменчивости микроорганизмов.

12 Особенности репродукции РНК- и ДНК-вирусов. Репродуктивная стадия когда в клетке накапливаются или репродуцируются вирусные частицы, т.е. клетка сама воспроизводит вирусные частицы. Репродукция ДНК –х вирусов идет в ядре, а у РНК-овых идет в цитоплазме на рибосомах. ДНК вир.. Идет адсорбция вируса на мембране , проникновение (эндоцитоз)-виропексис, депротонизация капсида (разрушение мембраны) и получаем ДНК самой клетки и нуклеиновую кислоту вируса. Образуется РНКзависимая

полимераза, которая направляется на рибосомы и образует ранние белки. Далее регуляторные и матричные (М) белки они нужны для прохода через мембрану клетки. Далее вирусная ДНК-полимераза, которая идет в ядро, где строительный материал где идет репликация ДНК. У вируса есть белковая оболочка. Клеточная полимераза идет в рибосомы и образуется капсидные белки. Далее идет сборка в цитоплазме из ДНК идут к видоизмененной мембране отптчковываются и забирают свойства нашей мембраны. Вирус

прикрывает себя нашими АГ. У РНК-х вирусов зависит от РНК+ и РНК-. РНК+ выполняет функцию информационной, матричной, транспортной. Сначало адсорбция, виролексис (то же самое что ДНК), депротонизация высвобождается РНК+ , которые идут к рибосомам и образуется длинные полипептидные нити. Протеазы делают их короткими. А другое направление: на матрице + образуются “ – “ (минус) это репликативная форма становится двунитчатой + и “– “ и с “ –“ идет репликация на + ниточек. Короткие нити

идут в рибосомы образуется РНК-полимераза идет синтез белковых структур. Идет сборка. Уходят через мембрану, испорченную М-белками. Ретровирусы (ВИЧ, онкогенные вир.) имеют фермент обратную транскриптазу. Она + . Обладают способностью встраиватся в хромосому клетки хозяина. РНК превращается в ДНК. Вирус попал в клетку путем слияния мембран, освобождается РНК+ (обратная транскриптаза), каторая на матрице РНК строит ДНК (минусовую). Клетка достраивает ДНК нормальную, кото

рая направляется в ядро и клеточные ферменты разрезают и встраивают вирусную ДНК в хромосом клетки. Клеточные ферменты образуют РНК+ , матричную вир. РНК и в рибосомах идёт синтез белковых структур (М, структурные и не структурные белков, шипы). Выход почкованием и захват кл. мембраны (фрагменты). РНК”-“. Унего РНК фрагментарная. Поступает в кл. слиянием мембран. Выход РНК- , кот. ничего не умеет делать. Образуется РНК+ , кот. идет в рибосомы, образуются структурные и не струк

турные белки это 1-е направление. 2-е направление: с помощью клеточной полимеразы где учавствует клеточная РНК-полимераза из + будут строится “-“ нити. Сборка. Отпочкование. Возможны мутации: где образуются с “-“ на + и идет из хромосом образуются ДНК полимеразы.

10 Вирус – существо или вещество? Это мельчайшие микроорганиз­мы, не имеющие клеточного строения, белоксинтезирующей си­стемы, содержащие только один тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК). Они отличаются особым способом размножения (репродукции): в клетке отдельно синтезируются нуклеиновые кислоты вирусов и их белки и за­тем происходит их сборка в вирусные частицы. Вирусы, являясь облигатными внутриклеточными паразитами, размножаются в цитоплазме или ядре клетки, нет кле

точной структуры, нет метаболизма, это закрытая система, оболочка не проницаема, нет роста, не чувствительны к антибиотикам(значит не живая), способны образовывать кристаллы (св-во не живой материи). Вирус является примитивным живым организмом. Потому что он размножается, т.е. воспроизводит потомство (воспроизводство клеткой той информации кот. заложена вирусной нуклеин. кл.), имеет обмен веществ кот. связан с обменом веществ зараженных клеток. Вирус обладает наследственностью,

кот. свойственена всем живым организмам, кот. обусловлена нуклеиновыми кислотами. Вирус как живое существо обладает изменчивостью, мутациям, приспособляемостью, к меняющимся условиям окр. среды. Признаком живой системы является наличие генов регуляторов: ген+ активное воспроизведение, ген- (минус) гасит их, ген+ - ( плюс, минус)– вялотекущий процесс. Может существовать в 2-х формах: внеклеточная (покоющаяся) и внутриклеточная (размножающаяся). Внеклеточные вирионы (это вирусная частица)

не обнаруживает никаких признаков жизни, попав в организм вирионы проникают в чувствительные к ним клетки и переходят из покоющихся в размножающуюся форму.

17 Особенности взаимодействия ретровирусов с клеткой. Ретровирусы (ВИЧ, онкогенные вир.) имеют фермент обратную транскриптазу. Она + . Обладают способностью встраиватся в хромосому клетки хозяина. РНК превращается в ДНК. Вирус попал в клетку путем слияния мембран, попадают 2-е нити РНК. 2-е нити не нужны. Вирусная РНКаза разрушает одну нить, осталась одна. Вриус РНК зависимая ДНК полимераза на матрице РНК строит одну нить ДНК. ДНК-полимераза достраивает 2-ю нить, получаем

нормальную 2-х нитчатую ДНК, которая отправляется в ядро. ДНК вируса встраивается –вирогения - идет латантная стадия, после чего репродуктивная стадия. Клеточная ДНК-зависимая РНК-полимераза начинает строить + нити РНК. В рибосомах образуются вирусные белки, сборка и почкование и вирус выходит захватив с собой компоненты клетки, в том числе компоненты клеточной мембраны, что подавляет иммунитет. Идет изменение генома вируса, т.е. мутации. Для встраивания с хромосомой клетки необходима кольцевая

форма двунитчатой вирусной ДНК. ДНК вируса, находящаяся в составе хромосомы клетки, назы­вается ДНК-провирусом. При делении клетки, сохраняющей свои нормальные функции, ДНК-провирус переходит в геном дочер­них клеток, т.е. состояние вирогении наследуется. ДНК-провирус несет дополнительную генетическую инфор­мацию, в результате чего клетки приобретают ряд новых свойств. Так, встраивание может явиться причиной возникновения ряда аутоиммунных и хронических заболеваний, разнообраз

ных опу­холей. Под воздействием ряда физических и химических факто­ров ДНК-провирус может исключаться из клеточной хромосо­мы и переходить в автономное состояние, что ведет к репро­дукции вируса.

15 Генетические рекомбинации и генетическая реактивация у вирусов. Мутации (изменение) — наследуемые измене­ния в генотипе, не связанные с явлениями рекомбинаций. Му­тации определяются изменениями последовательности нуклеотидов в ДНК. В основе изменчивости ви­русов лежат мутации. Мутации носят случайный характер или могут быть направленными. Вирус, являясь облигатным внутри­клеточным паразитом. Присутствие нескольких типов вирусов в инфици­рованных клетках, т.е. смешанная

инфекция, может приводить к мно­жественной реактивации, рекомбинации, кросс-реактивация; могут и негенетические взаимодействия — компле­ментация. Множественная реактивация — процесс взаимодей­ствия вирусов с поражением разных генов, в результате кото­рого взаимодействующие вирионы дополняют друг друга благо­даря генетической рекомбинации, образуя неповрежденный ви­рус. Рекомбинация — обмен генетическим материалом меж­ду вирусами — возможна в виде обмена генами

(межгенная ре­комбинация) или участками одного и того же гена (внутригенная рекомбинация). У вирусов рекомбинация происходит в про­цессе заражения двумя или более типами вирусов, отличающи­мися друг от друга по генетическим признакам. Вариантом ре­комбинации является перекрестная реактивация, или кросс-реактивация, происходящая в том случае, когда у одного из штаммов вируса часть генома повреждена, а другой геном нормальный. При смешанной инфекции двумя такими вирусами в результате

рекомбинации появляются штаммы вируса со свой­ствами родительских микроорганизмов.

16 Комплементация и фенотипическое смешивагие у вирусов. Мутации (изменение) — наследуемые измене­ния в генотипе, не связанные с явлениями рекомбинаций. Му­тации определяются изменениями последовательности нуклеотидов в ДНК. В основе изменчивости ви­русов лежат мутации. Мутации носят случайный характер или могут быть направленными. Вирус, являясь облигатным внутри­клеточным паразитом. Присутствие нескольких типов вирусов в инфици­рованных клетках, т.е. смешанная инфек

ция, может приводить к мно­жественной реактивации, рекомбинации, кросс-реактивация; могут и негенетические взаимодействия — компле­ментация. В качестве примера негенетического взаимодействия вирусов может быть приведена комплементация: при смешанной ин­фекции стимулируется репродукция обоих участников взаимодей­ствия или одного из них без изменения генотипов вирусов. Ком­плементация наблюда­ется между родственными, так и неродственными вирусами. Обмен генетическим ма

териалом при этом не наблю­дается. Если геном одного вируса заключен в капсид другого виру­са, этот феномен называется фенотипическим смешива­нием, наблюдаемым при смешанной инфекции. Изучение генетики микроорганизмов способствует решению многих ме­дицинских проблем: разработка патогенетических основ лечения и профилактики инфекционных болезней, спосо­бов диагностики (полимеразная цепная реакция, ДНК-зонды), создание профилактических, лечебных и диагностических пре­паратов.

3 Репродукция бактериофагов в бактериальной клетке. По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги. Ви­рулентные фаги, проникнув в бактериальную клетку, авто­номно репродуцируются в ней и вызывают лизис бактерий. ДНК фага, впрыскивается в цитоплазму клетки. После биосинтеза фаговых компонентов и их самосборки в бактериальной клетке накапливается до 200 новых фаговых ча­стиц. Затем выход фагового потомства в окружающую среду и лизис бактерии. Это репродуктивный

цикл. Умеренные фаги лизируют не все клетки в популяции, с частью из них они вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае гено­мом фага называют профаг. Профаг, не вызывая ее лизиса, передается по наслед­ству от клетки к клетке. Био­логическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизогенией, а культура бакте­рий, содержащая профаг, получила название лизогенной. Это отражает способность профага самопроиз

вольно или под действи­ем ряда физических и химических факторов исключаться из хро­мосомы клетки и переходить в цитоплазму, т. е. вести себя как вирулентный фаг, лизирующий бактерии. Лизогенные культуры невосприимчивы к повторному заражению близкородственным фагом и приобретают дополнительные свойства, которые находятся под контролем генов профага. Изменение свойств мик­роорганизмов под влиянием профага получило название фаго­вой конверсии и касается различных их свойств: культу

ральных, биохимических, токсигенных, антигенных, чувствительности к антибиотикам и др. Кроме того, переходя из интегрированного состояния в вирулентную форму, умеренный фаг может захва­тить часть хромосомы клетки и при лизисе последней перено­сит эту часть хромосомы в другую клетку. Если микробная клет­ка станет лизогенной, она приобретает новые свойства. Фаги учавствуют в рекомбинативной форме изменчивости – трансдукции. Трансдукция — передача ДНК от бактерии-донора к бактерии-реципиенту

при участии бактериофага. Умеренный фаг (у него интегративное св-во ) он включается в виде профага, под действием каких то факторов он переходит в вирулентный фаг. Под действием УФ-лучей –это сильный мутогенный фактор (в норме вырезание по краям ДНК фага , но к сожалению вырезание идет – включается ДНК кл.-репродукция фагов –лизис. Получаем фаг с ДНК бактерии и он потерял несколько генов и он называется дефектный фаг. Потерял гены лизогенезация он не может стать вирулентным. Дефектный фаг

может попасть в реципиента и принести фрагмент двунитчатой ДНК донора. Таким образом, умеренные фаги являются мощным фак­тором изменчивости микроорганизмов.

8 Особенности структурной организации и химического состава вирусов. Это мельчайшие микроорганиз­мы, не имеющие клеточного строения, белоксинтезирующей си­стемы, содержащие только один тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК). Вирусы, являясь облигатными внутриклеточными паразитами, размножаются в цитоплазме или ядре клетки, это закрытая система, оболочка не проницаема, нет роста, структуры вируса воспроизводятся клеткой, не чувствительны к антибиотикам. Сформированная вирусная

частица называется вирионом. Форма вирионов: палочковидноя, пулевидная, сферическая,в виде сперматозоида (бактериофаги). Различают ДНК-содержащие и РНК-содержащие вирусы. Геном вирусов представлен различными видами нуклеиновых кислот: двунитчатыми, однонитчатыми, линейными, кольцевыми, фрагментированными. Среди РНК-содержащих вирусов различают вирусы с положительным (плюс-нить РНК) геномом. Плюс-нить РНК этих вирусов выполняет наследственную функцию и

функцию информационной РНК (иРНК). Имеются также РНК-содержащие вирусы с отрицатель­ным (минус-нить РНК) геномом. Минус-нить РНК выполняет только наследственную функцию. Нуклеиновые кислоты некоторых вирусов могут находиться в цитоплазме инфициро­ванных клеток, напоминая плазмиды. Различают просто устроенные и сложно устроенные вирусы. У просто устроенных вирусов (ДНК или РНК) нуклеиновая кислота свя­зана с белковой оболочкой, называемой капсидом. Капсид состоит из повто

ряющихся морфологических субъединиц — капсомеров. Нуклеиновая кислота и капсид, вза­имодействуя друг с другом, образуют нуклеокапсид. Некоторые имеют шипики, метаболизма нет, капсомеры выполняют роль рецепторов. У сложно устроенных вирусов капсид окружен дополнительной липопротеидной оболочкой — суперкапсидом (производное мембранных структур клетки-хозяина), имеющей гликопротеиновые “шипы”, гемагглютинин Н, нейраминидазу , ферменты. Могут быть ДНК-полимераза,

РНК-полимераза и РНК-зависимаяДНК-полимера за на РНК строится ДНК (обратная транскриптаза). Капсид и суперкапсид защищают вирионы от влияния окру­жающей среды, обусловливают избирательное взаимодействие (адсорбцию) с клетками, определяют антигенные и иммуногенные свойства вирионов. Внутренние структуры вирусов называ­ются сердцевиной. Известны вирусы — прионы — белковые инфекционные ча­стицы, являющиеся агентами белковой природы, имеющие вид фибрилл, нет нуклеино

вой кислоты. Близкими к вирусам, явля­ются вироиды — небольшие молекулы кольцевой, суперспирализованной РНК, не содержащие белка, вызывающие забо­левания у растений.

11 Характеристика процесса взаимодействия вируса с клеткой. Известны три типа взаимодействия вируса с клеткой: 1) продуктивный тип, завершающийся образованием вирусного потомства; 2) абортивный тип, не завершающийся образованием новых ви­русных частиц, инфекционный процесс прерыва­ется на одном из этапов; 3) интегративный тип, или вирогения, характеризующийся встра­иванием вирусной ДНК в хромосому клетки-хозяина. Вирус вне клетки не проявляет никаких свойств и называется вирион.

Этапы взаимодействия вирусов с клетками- репродукция вирусов (воспроизводить) осуществляется в несколько стадий, последовательно сменяющих друг друга: 1) адсорбция вируса на мембране клеток при попадании на слизистые из вне. Взаимодействие рецепторов вируса с рецепторами клетки строго специфично, т.е. вирусы обладают тропизмом (дерматотропные, энтеротропные, иммунотропные и т.д). 2) проникновение вируса в клетку. Существует два способа проникновения. Клетка забирает (эндоцитоз) внутрь- ви

ропексис. Слияние вирусной оболочки с клеточной мембраной. Бактериофаг впрыскивает нуклеиновую кислоту в клетку. 3) депротонизация капсида (разрушение мембраны) и получаем ДНК самой клетки и нуклеиновую кислоту вируса. Освобождение внутреннего компонента вируса способного вызвать заболевание. В клетке находится ДНК и РНК хозяина и вируса. 4) синтез “ранних белков” вирусных компонентов в клетке кот. тормозят синтез клеточных компонентов, а иногда их и разрушают и используют как строительный

материал. Это скрытый период назыв.- эклипса. 5) репликация нуклеин. к-ты и структурных и функциональных белков. Всё это образуется отдельно. 6) сборка вирусных частиц.Нуклеиновая кислота конкурирует с генетической информацией клетки и заставляет ее синтезировать вирус­ные белки. Реализация генетической информации вируса осуществляет­ся в соответствии с транскрипции, трансляции и репликации. 7) выход вирусных частиц. Различают два типа выхо­да вирусного потомства из клетки. Первый тип — взрыв

ной или цитолиз— характеризуется выходом большого количества вирусов.. При этом клетка быстро погибает. Но может вирус остаться и образуется внутриклеточные включения “кладбище вирусов”. Второй тип — почкование. Клетка остаётся не нарушенной идёт отпочкование от мембраны не нарушая мембрану клетки. Ещё возможны варианты: 1- трансформация клетки в злокачественную; 2- пролиферация (бородавки) идёт просто размножение; 3- изменение функциональной активности клетки; 4- изменение АГ свойств

(клетка становится аутоантигеном); 5- выход дефектного вируса (ню). Репликация ДНКовых вирусов идет в ядре, а у РНКовых в цитоплазме на рибосомах.

6 Процессы изменчивости бактерий, обусловленные бактериофагами. По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги. Ви­рулентные фаги, проникнув в бактериальную клетку, авто­номно репродуцируются в ней и вызывают лизис бактерий. Это репродуктивный цикл. Умеренные фаги лизируют не все клетки в популяции, с частью из них они вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае гено­мом фага называют профаг. Профаг, не

вызывая ее лизиса, передается по наслед­ству от клетки к клетке. Био­логическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизогенией, а культура бакте­рий, содержащая профаг, получила название лизогенной. Это отражает способность профага самопроизвольно или под действи­ем ряда физических и химических факторов исключаться из хро­мосомы клетки и переходить в цитоплазму, т. е. вести себя как вирулентный фаг, лизирующий бактерии. Лизогенные культуры невосприимчи

вы к повторному заражению близкородственным фагом и приобретают дополнительные свойства, которые находятся под контролем генов профага. Изменение свойств мик­роорганизмов под влиянием профага получило название фаго­вой конверсии и касается различных их свойств: культуральных, биохимических, токсигенных, антигенных, чувствительности к антибиотикам и др. Кроме того, переходя из интегрированного состояния в вирулентную форму, умеренный фаг может захва­тить часть хромосомы клетки и

при лизисе последней перено­сит эту часть хромосомы в другую клетку. Если микробная клет­ка станет лизогенной, она приобретает новые свойства. Фаги учавствуют в рекомбинативной форме изменчивости – трансдукции. Трансдукция — передача ДНК от бактерии-донора к бактерии-реципиенту при участии бактериофага. Умеренный фаг (у него интегративное св-во ) он включается в виде профага, под действием каких то факторов он переходит в вирулентный фаг. Под действием УФ-лучей–это сильный мутогенный фак

тор (в норме вырезание по краям ДНК фага, но к сожалению вырезание идет – включается ДНК кл.-репродукция фагов –лизис. Получаем фаг с ДНК бактерии и он потерял несколько генов и он называется дефектный фаг. Потерял гены лизогенезация он не может стать вирулентным. Дефектный фаг может попасть в реципиента и принести фрагмент двунитчатой ДНК донора. Таким образом, умеренные фаги являются мощным фак­тором изменчивости микроорганизмов.

13 Понятие о вирогении, её механизм и последствия для клетки и организма. Интегративный тип взаимодействия (вирогения) характеризует­ся встраиванием нуклеиновой кислоты вируса в хромосому клетки. Встраивание характерна для вирусов: бактериофагов, опухолеродных (онкогенных) вирусов, некоторых инфекционных вирусов (вирус гепатита В, аденовирус, ВИЧ). Вирус попал в клетку путем слияния мембран, попадают 2-е нити РНК. 2-е нити не нужны. Вирусная РНКаза разрушает одну нить, осталась одна.

Вриус РНК зависимая ДНК полимераза на матрице РНК строит одну нить ДНК. ДНК-полимераза достраивает 2-ю нить, получаем нормальную 2-х нитчатую ДНК, которая отправляется в ядро. ДНК вируса встраивается –вирогения - идет латантная стадия, после чего репродуктивная стадия. Клеточная ДНК-зависимая РНК-полимераза начинает строить + нити РНК. В рибосомах образуются вирусные белки , сборка и почкование и вирус выходит захватив с собой компоненты клетки, в том числе компоненты клеточной мембраны,

что подавляет иммунитет. Идет изменение генома вируса , т.е. мутации. Для встраивания с хромосомой клетки необходима кольцевая форма двунитчатой вирусной ДНК. ДНК вируса, находящаяся в составе хромосомы клетки, назы­вается ДНК-провирусом. При делении клетки, сохраняющей свои нормальные функции, ДНК-провирус переходит в геном дочер­них клеток, т.е. состояние вирогении наследуется. ДНК-провирус несет дополнительную генетическую инфор­мацию, в результате чего клетки приобретают ряд но

вых свойств. Так, встраивание может явиться причиной возникновения ряда аутоиммунных и хронических заболеваний, разнообразных опу­холей. Под воздействием ряда физических и химических факто­ров ДНК-провирус может исключаться из клеточной хромосо­мы и переходить в автономное состояние, что ведет к репро­дукции вируса.

25 Интерферон, история открытия, характеристика химического состава. Интерферон открыт в 1957 г Айзексом и Линдеманом при изучении интерференции вирусов. Они обнаружили, что аллантоисная жидкость куриных эмбрионов, в которые был введен облученный вирус, обладает интерферирующей активностью. Вещество, ответственное за эту активность – интерферон. Интерферон относится к неспецифическим факторам противовирусной резистентности. Семейство интерферонов включает более 20

белков, которые объеденены в 3 группы по источнику происхождения: a-интерферон (лейкоцитарный), b-интерферон (фибробластный), g-интерферон (иммунный) – вырабатывается антигенпрезентирующими клетками и Т-лимфоцитами, сенсибилизированных антигенами, участвует в регуляции имунного ответа, усиливает появление на поверности клеток МНС I и МНС II, что увеличивает возможность соединения с антигеном; регулирует соотношение Тх1 и Тх2; регулирует нормальный апоптоз; активизирует нормаль

ные киллеры и СД8 на уничтожение клеток, пораженных вирусом и трансформированных в опухолевую клетку.

26 Классификация человеческих интерферонов. Интерферон относится к неспецифическим факторам противовирусной резистентности. Семейство интерферонов включает более 20 белков, которые объеденены в 3 группы по источнику происхождения: a-интерферон (лейкоцитарный) –егополучают из лейкоцитов крови; b-интерферон (фибробластный) – его получают при заражении вирусами культуры клеток фибробластов; g-интерферон (иммунный) – вырабатывается вырабатывается антигенпрезентирующими

клетками и Т-лимфоцитами, сенсибилизированных антигенами, участвует в регуляции имунного ответа, усиливает появление на поверности клеток МНС I и МНС II, что увеличивает возможность соединения с антигеном; регулирует соотношение Тх1 и Тх2; регулирует нормальный апоптоз; активизирует нормальные киллеры и СД8 на уничтожение клеток, пораженных вирусом и трансформированных в опухолевую клетку.

28 Механизм противовирусного действия интерферона. Интерферон относится к неспецифическим факторам противовирусной резистентности. При попадании вируса в клетку, она гибнет ® из клетки выходят вирус и интерферон. Интерферон обволакивает рядом расположенные непораженные клетки. В этих клетках появляются 2 фермента, которые нарушают репродукцию вируса: 1 – Протеинкиназа. 2 – 2,3-олигоаденилатциклаза – поражает матричную вирусную нуклеиновую кислоту. Вывод: для лечения интерфе

рон следует принимать после появления первых симптомов, в течение 6-8 часов, т.к интерферон должен защищать непораженные вирусом клетки. В целях профилактики интерферон можно закапывать, однако его действие непродолжительно, т.к он инактивируется ферментными системами. Лучше вводить индуктор интерферона (двунитчатая и однонитчатая РНК, искусственно синтезированные нуклеопротеиды).

9 Определение понятия “вирус” и принципы классификации вирусов. Это мельчайшие микроорганиз­мы, не имеющие клеточного строения, собственного метаболизма, содержащие только один тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК). Вирусы, являясь облигатными внутриклеточными паразитами, размножаются в цитоплазме или ядре клетки. У них нет клеточной структуры, нет метаболизма, это закрытая система, оболочка не проницаема, нет роста, не чувствительны к антибиотикам. Сформированная вирусная

частица называется вирионом. Форма вирионов: палочковидной, пулевидной, сферической,в виде сперматозоида (многие бактериофаги). Различают ДНК-содержащие и РНК-содержащие вирусы. Геном вирусов представлен различными видами нуклеиновых кислот: двунитчатыми, однонитчатыми, линейными, кольцевыми, фрагментированными. Среди РНК-содержащих вирусов различают вирусы с положительным (плюс-нить РНК) геномом. Плюс-нить РНК этих вирусов выполняет наследственную функ

цию и функцию информационной РНК (иРНК). Имеются также РНК-содержащие вирусы с отрицатель­ным (минус-нить РНК) геномом. Минус-нить РНК выполняет только наследственную функцию. Различают просто устроенные и сложно устроенные вирусы. У просто устроенных вирусов нуклеиновая кислота свя­зана с белковой оболочкой, называемой капсидом. Капсид состоит из повторяющихся морфологических субъединиц — капсомеров. Нуклеиновая кислота и капсид, вза­имодействуя друг с другом, образуют

нуклеокапсид. У сложно устроенных вирусов капсид окружен дополнительной липопротеидной оболочкой — суперкапсидом имеющей “шипы”. В основу классификации вирусов положены признаки: 1) тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК), ее структура, ко­личество нитей (одна или две), особенности воспроизводства вирусного генома; 2) размер и морфология вирионов, количество капсомеров и тип симметрии; 3) наличие суперкапсида; 4) тип хозяина — вирусы человека и животных, растений, бактериофаги; 5) место

размножения в клетке; 6) антигенные свойства. Известны вирусы — прионы — белковые инфекционные ча­стицы, являющиеся агентами белковой природы, имеющие вид фибрилл (инфекционные фибриллярные нити). Нет нуклеиновой кислоты. Другими агентами, близкими к вирусам, явля­ются вироиды — небольшие молекулы кольцевой, суперспирализованной РНК, не содержащие белка, вызывающие забо­левания у растений.

4 Практическое использование бактериофагов в медицине и микробиологии. Применение фагов основано наихстрогой специфичности действия. Фаги используют в диагностике инфекционных болезней: 1) с помощью известных (диагностических) фагов проводят идентификацию выделенных культур микроорганизмов. Вследствие высокой специфичности фагов можно определить вид воз­будителя или варианты (типы) внутри вида. Фаготипирование имеет большое эпидемиологическое значение, так как позволя­ет

установить источник и пути распространения инфекции; 2) с помощью тест-культуры можно определить неизвестный фаг в исследуемом материале, что указывает на присутствие в нем соответствующих возбудителей. Фаги применяют для лечения и профилактики инфекционных болезней. Производят брюшнотифозный, дизентерийный, синегнойный, стафилококковый фаги и комбинированные препараты. Спо­собы введения в организм: местно, энтерально или парентерально. Умеренные фаги используют в гене

тической инженерии и биотехнологии в качестве векторов для получения рекомбинантных ДНК . Дефектный фаг учавствует в трансдукции кот. дает : 1) резистентность к лекарст.препаратам.; 2) образование капсулы; 3) синтез ферментов ращепляющих углеводы . 3-и вида трансдукции: 1) генерализованная. Когда умеренный фаг встраивается в донора в любом месте хромосомы и забирает разные участки и св-ва; 2) спецефическая есть фаг он встраивается в одном месте и переносит всегда ген-способность синтезировать фермент

галактоза; 3) абортивная форма. Когда при делении кл. фаговая ДНК передаётся только одной клетки и признак теряется, т.е. нет репликации данного участка . Изменение свойств мик­роорганизмов под влиянием профага получило название фаго­вой конверсии и касается различных их свойств: культуральных, биохимических, токсигенных, антигенных, чувствительности к антибиотикам и др. Умеренные фаги могут нанести вред микробиологическому производству. Так, если микроорганизмы, используемые в каче­стве

продуцентов вакцин, антибиотиков и других биологических веществ, оказываются лизогенными, существует опасность пе­рехода умеренного фага в вирулентную форму, что неминуемо приведет к лизису производственного штамма.

5 Сравнительная характеристика вирулентного и умеренного бактериофага. По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги. Ви­рулентные фаги, проникнув в бактериальную клетку, авто­номно репродуцируются в ней и вызывают лизис бактерий. Эти фаги адсорбируются на по­верхности бактериальной клетки за этим ДНК фага, содержаща­яся в головке, проходит через полость хвостового стержня и впрыскивается в цитоплазму клетки. Под действием фагового лизоцима и внутрикле

точного ос­мотического давления происходит разрушение клеточной стен­ки, выход фагового потомства в окружающую среду и лизис бактерии. Умеренные фаги лизируют не все клетки в популяции, с частью из них они вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае гено­мом фага называют профаг. Профаг, не вызывая ее лизиса, передается по наслед­ству от клетки к клетке. Био­логическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизо

генией, а культура бакте­рий, содержащая профаг, получила название лизогенной. Это отражает способность профага самопроизвольно или под действи­ем ряда физических и химических факторов исключаться из хро­мосомы клетки и переходить в цитоплазму, т. е. вести себя как вирулентный фаг, лизирующий бактерии. Лизогенные культуры невосприимчивы к повторному заражению близкородственным фагом и приобретают дополнительные свойства, которые находятся под контролем генов профага. Изменение

свойств мик­роорганизмов под влиянием профага получило название фаго­вой конверсии и касается различных их свойств: культуральных, биохимических, токсигенных, антигенных, чувствительности к антибиотикам и др. Кроме того, переходя из интегрированного состояния в вирулентную форму, умеренный фаг может захва­тить часть хромосомы клетки и при лизисе последней перено­сит эту часть хромосомы в другую клетку. Если микробная клет­ка станет лизогенной, она приобретает новые свойства. Таким образом, уме

ренные фаги являются мощным фак­тором изменчивости микроорганизмов.

7 Характеристика процессов общей, специфической и абортивной трансдукции. Трансдукция (перенос, перемещение) — передача ДНК от бактерии-донора к бактерии-реципиенту при участии бактериофага. Различают неспецифическую (общую) транедукцию, при которой возможен перенос любого фрагмен­та ДНК донора, и специфическую — перенос определен­ного фрагмента ДНК донора только в определенные участки ДНК реципиента. Неспецифическая трансдукция обусловлена включе­нием ДНК доно

ра в головку фага дополнительно к геному фага или вместо генома фага (дефектные фаги). Специфическая транс­дукция - Фаговая ДНК, несущая фрагменты хромосомы клетки-донора, включается в строго определенные участки хромосомы клетки-реципиента. Таким образом, привно­сятся новые гены и ДНК фага в виде профага репродуцируется вместе с хромосомой, т.е. этот процесс сопровождается лизогенией. (вирулентный фаг попав в кл.- репродукция-гибель бактерии). В доноре побывал умеренный фаг. Там стал

дефектным и он попадает в кл. реципиента. Умеренный фаг (у него интегративное св-во ) он включается в виде профага , под действием каких то факторов он переходит в вирулентный фаг. Под действием УФ-лучей –это сильный мутогенный фактор (в норме вырезание по краям ДНК фага , но к сожалению вырезание идет – включается ДНК кл.-репродукция фагов –лизис. Получаем фаг с ДНК бактерии и он потерял несколько генов и он называется дефектный фаг . Потерял гены лизогенезация он не может стать виру

лентным. Дефектный фаг может попасть в реципиента и принести фрагмент двунитчатой ДНК донора. Трансдукция дает : 1) резистентность к лекарст.препаратам.; 2) образование капсулы; 3) синтез ферментов ращепляющих углеводы . 3-и вида трансдукции: 1) генерализованная. Когда умеренный фаг встраивается в донора в любом месте хромосомы и забирает разные участки и св-ва ; 2) спецефическая есть фаг он встраивается в одном месте и переносит всегда ген-способность синтезировать фермент галакто

за. ; 3) абортивная форма . Когда при делении кл. фаговая ДНК передаётся только одной клетки и признак теряется,т.е. нет репликации данного участка.

19 Механизм развития вирусной болезни. 1) В клетку попал вирус и на клетке появляются МНС1 кл. + вир. АГ и выставляет на поверхность –это сигнал для цитотоксического лимфоцита СД8 он своими рецепторами узнаёт МНС1кл. и выделяет порины и выстреливает гранзимы ( порины делают дырки, порины нарушают ферменты) . При гепатите В появляются Fas рецепторы. Некоторые популяции СД8 имеет Fas-лиганд и запускается апоптоз. Клетка погибает через 6ч.. 2) вариант. На клетке вирус, т.е. чужой АГ.

Кнему прикрепляется IgG, на другой АГ комплемент. Идёт образование МАК (антителозависимая цитотоксичность). Будут работать НК (нормальные киллеры)- они тоже проявляют цитотоксичность, но они не совсем изучены. Есть Тх1 и Тх2 .. На Тх1 вирус не адсорбируется, а он активизирует Тх2, т.е. идет гуморальный ответ и должно быть много АТ, но идет не специфическое образование АТ (их много ,а активных центров нет). Вирусы являются внутриклеточными облигатными паразита­ми. Они размножаются в

клетках за счет их ресурсов. Часть ви­русов находится внутри, а часть — вне клетки. Поскольку анти­тела не проникают в клетки, они неэффективны против внут­риклеточного вируса и действуют только на внеклеточный ви­рус. Вирус инактивирует на поверхности слизистых оболочек секреторный IgA. АТ не влияют на внутриклеточную репродукцию вируса, а только препятствуют генерализации вирусной инфекции. Активны в противовирусном иммунитете цитотоксические лимфоциты, уничтожающие инфицированные

вирусом клетки. Фагоцитоз вирионов, пораженных клеток с содержащимся в них вирусом, наблюдается незавершенный фагоцитоз. Мощным фактором противовирусного иммунитета является интерферон, он не действует на вирус. Поэтому профилактичес­кий эффект интерферона сильнее, чем лечебный. Ин­терферон вызывает в клетке, инфицированной вирусом, состо­яние антивирусной резистентности, подавляющих синтез компонентов вирусов.

20 Особенности патогенеза вирусных болезней.. 1) В клетку попал вирус и на клетке появляются МНС1 кл. + вир. АГ и выставляет на поверхность –это сигнал для цитотоксического лимфоцита СД8 он своими рецепторами узнаёт МНС1кл. и выделяет порины и выстреливает гранзимы ( порины делают дырки, порины нарушают ферменты) . При гепатите В появляются Fas рецепторы. Некоторые популяции СД8имеетFas-лиганд и запускается апоптоз. Клетка погибает через 6ч.. 2) вариант. На клетке вирус, т.е. чужой АГ.

Кнему прикрепляется IgG, на другой АГ комплемент. Идёт образование МАК (антителозависимая цитотоксичность). Будут работать НК (нормальные киллеры)- они тоже проявляют цитотоксичность, но они не совсем изучены. Есть Тх1 и Тх2 .. На Тх1 вирус не адсорбируется, а он активизирует Тх2, т.е. идет гуморальный ответ и должно быть много АТ, но идет не специфическое образование АТ (их много ,а активных центров нет). Вирусы являются внутриклеточными облигатными паразита­ми. Они размножаются в

клетках за счет их ресурсов. Часть ви­русов находится внутри, а часть — вне клетки. Поскольку анти­тела не проникают в клетки, они неэффективны против внут­риклеточного вируса и действуют только на внеклеточный ви­рус. Вирус инактивирует на поверхности слизистых оболочек секреторный IgA. АТ не влияют на внутриклеточную репродукцию вируса, а только препятствуют генерализации вирусной инфекции. Активны в противовирусном иммунитете цитотоксические лимфоциты, уничтожающие инфицированные

вирусом клетки. Фагоцитоз вирионов, пораженных клеток с содержащимся в них вирусом, наблюдается незавершенный фагоцитоз. Мощным фактором противовирусного иммунитета является интерферон (ИФ), он не действует на вирус. Поэтому профилактичес­кий эффект интерферона сильнее, чем лечебный. Ин­терферон вызывает в клетке, инфицированной вирусом, состо­яние антивирусной резистентности, подавляющих синтез компонентов вирусов.

21 Факторы неспецифической противовирусной резистентности. К постоянно действующим факторам неспецифической противовирусной резистенстности относят: 1 – Клеточные факторы: а – отсутствие рецепторов у вируса к нашим клеткам, б – отсутствие в клетке ферментов депротеинизации (разрушение капсида), в – отсутствие клеточных ферментов для репродукции вируса. 2 – Гуморальные факторы – это термостабильные сывороточные ингибиторы (гликопротеины): a-ингибиторы –75°,b-ингибиторы –

65°, g-ингибиторы – 100°. Существует гипотеза, что термостабильные ингибиторы это оторвавшиеся клеточные рецепторы, которые соединяются с каким-то кофактором (кофактор+ингибитор). К неспецифическим факторам, индуцированным вирусом относят интерферон (a и b).

29 Характеристика интерферона как одного из цитокинов организма. Цитокины вырабатываются антигенпрезентирующими клетками и Т- и В-лимфоцитами – участвуют в межклеточной кооперации. Выделяют: a-интерферон (лейкоцитарный) – его получают из лейкоцитов крови; b-интерферон (фибробластный) – его получаютпризаражении вирусами культуры клеток фибробластов; g-интерферон (иммунный) – участвует в регуляции имунного ответа, усиливает появление на поверности клеток МНС I и МНС II, что

увеличивает возможность соединения с антигеном; регулирует соотношение Тх1 и Тх2; регулирует нормальный апоптоз; активизирует нормальные киллеры и СД8 на уничтожение клеток, пораженных вирусом и трансформированных в опухолевую клетку.

18 Основные отличия вирусных болезней от бактериальных. 1) бактерии выделяют токсины и ферменты. А вирус ничего не выделяет , он разрушает наши клетки и интоксикация нашими клетками. 2) имеет место вирусомия (вирус в крови), а при бактер. инф. редко ( брюшной тиф). 3) при воздействии вир. наши клетки могут стать аутоантигенами, а при бак. редко (ревматизм). 4) при вир. – подавление иммунитета- осложнение резидентами, т.е. апортунистические. Пример: корь, стоматиты, отиты, гломелуронефриты.

5) лечение. При вир. антибиотики не помагают. Препараты: ИФ, ремонтадин, который не даёт вирусу раздеться, т.е. депротонизация.

24 Структура и роль sIgА в противовирусной резистентности.. Антитела являются специфическими гуморальными факторами противовирусной резистентности. Они действуют на вирус при нахождении его вне клетки (у места входных ворот и в крови – вирусемия). Главную роль в противовирусной резистентности среди антител играет секреторный Ig класса А (sIgA). sIgA является димером, в котором находится секреторный компонент (имеется в эпителиальной клетке). Он придает устойчивость и соединен J-цепью

(join). sIgA находятся на всех слизистых оболочках и препятствуют адгезии вируса. Кроме sIgA в противовирусной резистентности принимают участие IgG и IgM.

22 Характеристика химического состава, происхождения и роли ингибиторов. Ин-гибиторы относят к неспецифическим гумо-ральным факторам противовирусной резис-тенстности. Это термостабильные сыворо-точные ингибиторы, которые являются гли-копротеинами. Выделяют: a-ингибиторы – 75°, b-ингибиторы – 65°, g-ингибиторы –100°.Существует гипотеза, что термостбиль-ные ингибиторы это оторвавшиеся клеточные рецепторы, которые соединяются с каким-то кофактором (кофактор + ингибитор).

23 Роль антител различных классов в резистентности против вирусов. Антитела являются специфическими гуморальными факторами противовирусной резистентности. Они действуют на вирус при нахождении его вне клетки (у места входных ворот и в крови – вирусемия). Главную роль в противовирусной резистентности среди антител играет секреторный Ig класса А (sIgA). sIgA находятся на всех слизистых оболочках и препятствуют адгезии вируса. Кроме sIgA в противовирусной резистентности

принимают участие IgG и IgM.

27 Интерферон как тканеспецифический фактор противовирусной резистентности. Интерферон относится к неспецифическим факторам противовирусной резистентности. При попадании вируса в клетку, она гибнет ® из клетки выходят вирус и интерферон. Интерферон обволакивает рядом расположенные непораженные клетки. В этих клетках появляются 2 фермента, которые нарушают репродукцию вируса: 1 – Протеинкиназа. 2 – 2,3-олигоаденилатциклаза – поражает матричную вирусную нуклеиновую ки

слоту.

ВИРУСЫ 2

1 Структура и принципы классификации бактериофагов

2 Механизм взаимодействия бактериофагов с клеткой

3 Репродукция бактериофагов в бактериальной клетке

4 Практическое использование бактериофагов в медицине и микробиологии

5 Сравнительная характеристика вирулентного и умеренного бактериофага

6 Процессы изменчивости бактерий, обусловленные бактериофагами

7 Характеристика процессов общей, специфической и абортивной трансдукции

8 Особенности структурной организации и химического состава вирусов

9 Определение понятия “вирус” и принципы классификации вирусов

10 Вирус – существо или вещество?

11 Характеристика процесса взаимодействия вируса с клеткой

12 Особенности репродукции РНК- и ДНК-вирусов

13 Понятие о вирогении, её механизм и последствия для клетки и организма

14 Общая характеристика механизмов изменчивости вирусов

15 Генетические рекомбинации и генетическая реактивация у вирусов

16 Комплементация и фенотипическое смешивагие у вирусов

17 Особенности взаимодействия ретровирусов с клеткой

18 Основные отличия вирусных болезней от бактериальных

19 Механизм развития вирусной болезни

20 Особенности патогенеза вирусных болезней

21 Факторы неспецифической противовирусной резистентности

22 Характеристика химического состава, происхождения и роли ингибиторов

23 Роль антител различных классов в резистентности против вирусов

24 Структура и роль sIgА в противовирусной резистентности

25 Интерферон, история открытия, характеристика химического состава

26 Классификация человеческих интерферонов

27 Интерферон как тканеспецифический фактор противовирусной резистентности

28 Механизм противовирусного действия интерферона

29 Характеристика интерферона как одного из цитокинов организма

4 Не обязательные компоненты стр-ры бактер кл:жгутики,пили,капсула, включения, плазмиды.Жгутики обеспечивают подвижность бактерий.Подвижность определяют в живом состоянии в тёмном поле зрения,но самих жгутиков не видно. Состоят из белка флагелина. Обладает антигенными сва-вами.Жгутики можно увидеть в эл микроскопе,при специальном окрашивании (серебрение, свечение) ..Пили-тончайшие нити,видны в эл.микроскопе. Функции пилей:адгезия. Конъюгативные пили(их 1-

4)передают плазмиды. Капсула это ослизнённый поверхностный слой из полисахаридов и гликополисахаридов клеточной стенки.Виды капсул: микрокапсула и обычная капсула.К капсульным бактериям относят:.клебсиела-озена имеет капсулу при любых обстоятельствах ,пневмококк и возбудитель чумы образуют капсулу только при попадании в живой организм. Капсулу можно обнаружить при окраске по Бури-Гинсу .Например при исследовании мазка из чистой культуры клебсиелы-озена, окрашенного по

Бури-Гинсу в поле зрения на коричневом фоне будут видны мелкие бесцветные образования внутри которых находятся небольшие коккобактерии.Капсула по этому методу не окрашивается.Также капсулу можно обнаружить при использовании феномена набухания и иммунолюминесцентного метода (будет свечение).Функции капсулы:защита от фагоцитоза и адгезия.Включения(волютин ) встречается у дифтерийной палочки. Зёрнышки волютина это поли и метафосфаты.Они выполняют трофическую функцию.

Плазмиды-дополнительные кольцевые ДНК, которые несут дополнительную нежизненноважную информацию.Например R-плазмида отвечает за лекарственную зависимость.Плазмида может существовать автономно или интегрировано.Может передаваться от одной клетки к другой через конъюгативные пили- это трансмиссивные плазмиды,они имеют трансген.Нетрансмиссивные плазмиды могут передаваться с помощью фагов,реже при трансформации.К плазмидам можно “пришить” любые гены.Их исполь

зуют как вектор для передачи свойств.По свойствам выделяют: 1.плазмиды,дающие вирулентность Ent+ плазмиды отвечают за синтез ентеротоксина,Hly за синтез гемолизина,К 88 отвечает за адгезию,умеренный фаг за лизогенную конверсию.Например синтез экзотоксина у дифтерийной палочки, палочки ботулизма происходит при наличии в клетке умеренного фага,т.е.при её лизогенизации.2.Плазмиды, дающие селективные преимущества:плазмиды колициогенности (синтез бактериями антибиотико подобных ве

ществ.У киш палочки колицин,у стафилококка стафилоцин).Р-плазмиды отвечают за множественную лекарственную резистентность.R-плазмида трансмиссивная (самостоятельная), r-плазмида нетрансмиссивная. 3. Плазмиды, изменяющие фенотипические cвойства: изменение ферментации различных углеводов, изменение поверхностных аг. Все плазмиды имеют F+ гены, отвечающие за синтез ферментов,инактивирующх антибиотики.

6 Особенности структуры L-форм,микоплазм,хламидий ,спирохет. L-формы это бактерии временно,потерявшие клеточную стенку под действием внешних факторов.,часто под действием антибиотиков.Это приводит к хронизации инфеционного процесса.Микоплазмы-мелки е бактерии,окружённые ЦПМ и не имеющие клеточной стенки.Из-отсутствия клеточной стенки они осмотически чувствительны, поэтому их сложно культивировать.Имеют разнообразную форму: кокковидную, нитевид

ную,колбовидную. Эти формы можно рассмотреть при фазово-контрастной микроскопии чистых культур микоплазм..Патогенные микоплазмы вызывают хронические инфекции.Mycoplasma pneuoniaeявляетсявозбудит елем заболевания по типу острой респираторной инфекции.Хламидии относятся к облигатным внутирклеточным кокковидным Гр- бактериям..Хламидии размножаются только в живых клетках:их рассматривают как энергетических паразитов..Вне клеток хламидии имеют сферическую форму, явля

ясь элементарными тельцами.Внутри клеток они превращаются в делящиеся ретикулярные тельца,образуя их скопление-включения.. Хламидии вызывают трахому, орнитоз, урогенит. хламидиоз, пневмонию. Спирохеты - тонкие, извитые, спиралевидные бактерии, отличающиеся подвижностью. Спирохеты состоят из клеточной стенки,окружающей протоплазматический цилиндр с ЦПМ и аксиальной нитью.Аксиальная нить находится под наружной мембраной и как бы закручивается вокруг протоплазматческого цилиндра

спирохеты,придавая ей винтообразную форму.Аксиальная нить состоит из фибрилл и представляет собой сократительный белок флагеллин.Они прикреплены к концам клетки и направлены навстречу друг лругу.Другой конец фибрилл свободен.Число фибрилл варьирует у разных видов. Фибриллы участвуют в передвижении спирохет. У спирохет параллельное деление(из 1 может получиться 4,6).Спирохеты плохо воспринимают красители.Спирохеты окрашиваются по методу Романовского –Гимзе в розоавый

цвет,но так как у неё мало нуклеопротеидов получается слабое окрашивание.Поэтому лучше пользоваться методом серебрения или исследовать в живом виде в тёмном поле зрения. 3родами,патогенные для человека:трепонема, боррелия,лептоспира. Спирохеты под действием лек.препаратов и ат может легко превращаться в L-формы, образовывать гранулярные формы и цисты. Поэтому часто встречаются поздние рецидивы.T. pallidum является возбудителем сифилиса, имеет 8-12 витков. Спирохета рода Borrelia –

возбудитель возвратного тифа,боррелиозов, имеет3-5 неровных завитков.Т.Leptospira попадая в организм с водой или с пищей приводит к развитию кровоизлияний и желтухи, имеет 18-20 мелких завитков и 2-3 крупных.На конце пуговки.

8 Особенности энергетического метаболизма у разных групп бактерий.У бактерий высокий уровень метаболизма.Все процессы метаболизма(биосинтез и катаболизм) идут в ЦПМ.Биосинтез требует затрат энергии, а катаболизм происходит с образованием энергии.Энергия образуется за счёт субстратного и окислительного фосфорилирования .А также бактерии могут использовать энергию фотосинтеза.Катаболизм-ды хание клетки,а биосинтез-её питание.Для регуляции этих процессов клетка имеет огромное ко

личнство ферментов.Констутивные ферменты есть всегда и у всех бактерий,это определяется генетически. Индуцибильные ферменты появляются у бактерий под действием субстрата. За синтез ферментов отвечает геном. Ген-регулятор влияет на белок репрессор > подавление аллостерических белков > нарушение регуляторной функции (появление или отсутствие фермента в клетке и его количество).Если белок прикрепляется к АДФ, то резко увеличивается синтез АТФ. Уровень метаболизма в любой клетке зави

сит от площади ЦПМ,которая увеличивается за счёт мезосом Кл стенка и ЦПМ не могут пропускать большие молекулы.Для их расщипления бактерия выделяет наружу экзоферменты,которые расщипляют макромолекулу на микромолекулы.У бакт.клетки на поверхности есть рецепторы,которые улавливают нужное вещество и ферменты пермиазы протаскивают это вещество в ЦПМ. Внутри клетки работают транслоказы.У гр+ бактерий роль рецепторов выполняют тейхоевые кислоты, у гр- порины,у микоплазмы

белковые ферменты ЦПМ.Питательные вещества могут поступать в клетку без затрат энергии(простая и облегчённая диффузия) и с затратой энергии(активный перенос против градиента концентрации, фосфорилирование).В метаболизме бактерий участвуют 3 вида ферментов:ферменты брожения, ферменты анаэробы, ферменты аэробные.Если работает больше ферментов,значит больше АТФ.По типу питания бактерии делятся на:1)строгие или облигатные анаэробы( возбудители столбняка,газовой гангрены, боту

лизма). 2) факультаттвные анаэробы 3) микроаэрофилы (возбудители бруцилёза, стрептококки) 4)строгие или облигатные аэробы.Им иногда нужна дополнительная аэрация (туберкул. пал).В энергетическом плане анаэробное дыхание менее выгодно. Когда кислород вмешивается в цикл окислительно-восстановите льных процессов образуются токсичные продукты. 1е + О2 = супероксид, 2е + О2 = перекись, 3е + О2 = Н2О + ОН. Вреден не О2, а продукты,которые получаются в результате его взаимодействия с элек

тронами. Уанаэробов нет ферментов каталазы,пероксидазы и супероксиддисмутазы. Конечным акцептором электронов при аэробном дыхании является кислород.При анаэробном дыхании-неорганические вещ-ва.При брожении конечным акцептором являются органические вещ-ва.

27 Коньюгация у бактерий , F+ и F- клетки. Конъюгация ( соединение) бактерий состоит в переходе генети­ческого материала (ДНК) из клетки-донора (“мужской”) в клет­ку-реципиент (“женскую”) при контакте клеток между собой. Мужская клетка содержит F-фактор, который контролирует синтез половых пилей, или F-пилей. Клетки, не содержа­щие F-фактора, являются женскими; при получении F-фактора они превращаются в “мужские” и сами становятся донорами. При конъюгации F-пили соединяют“мужскую”и

“женскую” клетки, обеспечивая переход ДНК через конъюгационный мостик или F-пили. Клетки,содержащиеF-фактор в цитоплазме, обозначаются F+; они передают F-фактор клеткам, обозначае­мым F- (“женским”), не утрачивая донорской способности, так как оставляют копии F-фактора. F-фактор располагается в цитоплазме в виде кольцевой двунитчатой молекулы ДНК, т. е. является плазмидой. Контактировать клетки будут если одна F+ а др. F- . Донор должен иметь плазмиду F+ а реципиент определенные ре

цепторы . Плазмида F+ в ней есть гены: 1) отвечающие за синтез секс-пилей от F+ есть пили , кот. определяют рецептор F- ; 2) гены отвечающие за саморепликацию,т.е. должен быть разрез ; 3) ДНК полимераза ; 4) трансфергены (гены переноса). Саморепликация –образуется мостик- одна нить F переходит в рецепиента (трансфер ген). ДНК полимераза подстраивают одну нить донора и у рецеп. – и кл. из F- (минус) стала F+. Это редко 10 в минус 7 степени. F+ обработали ипритом ( отравляющий газ) и клетка стала секс-бомбой

ее называют Hfr штамм с высокой частотой рекомбинаций 20-30 рек. на 100 кл. Секс –бомба из автономного состояния F перешла в интегривное F- (минус) + гены донора.. Разрез в точке О на границе фактора F иточкирибосом первой пройдет ДНК донора, а фактор F последний. Значит разрез на границе (т.О) и бактериальная хромосомапередалась в кл. реципиента через цитоплазматический мостик через 90 минут. F- (минус) была и остаётся, но приобретает гены донора, т.е.проявляет новые свойства. При конъюга

ции клеток Hfr и клеток F- хромосома разрывается и передается с определенного участка (начальной точки) в клет­ку F- , продолжая реплицироваться. Перенос всей хромосомы может длиться до 100 мин. Прерывая процесс конъ­югации (мостик) бактерий, можно определять последовательность распо­ложения генов в хромосоме- генетическую карту. Иногда F-фактор может при выхо­де из хромосомы захватывать небольшую ее часть, образуя так называемый замещенный фактор — F'. Приконьюгациипередается: 1) лекарствен

ная резистентность при помощи R-плазмид; 2) разные факторы вирулентности ; 3) ферменты ращепляющие углеводы; 4) АГ свойства.

12 Механизм образования и строения спор у бактерий.Споры-форма, бактерий с гр+ типом строения клеточной стенки.Споры образуются при неблагоприятных условиях существования бактерий.Внутри одной бактерии образуется одна спора.Образование спор является способом сохранения вида и не является способом размножения. Спорообразующие аэробные бактерии,у которых размер споры не превышает диаметр клетки называются бациллами,а спорообразующие анаэробные бактерии.у которых размер спо

ры превышает диаметр клетки наз. Клостридиями. ..Стадии спорообразования:нуклеоти д смещается к одному концу,идёт уплотнение всей структуры,далее происходит инвагинация и образование проспоры,затем формируется многослойная непроницаемая оболочка(кортекс).Спора сохраняется без питания, выдерживает температуру абсолютного нуля, может сохраняться на протяжении веков. Устойчивость обусловлена плотной многослойной кл оболочкой с высоким содержанием липидов и жировосков,переходом воды из

свободного в связанное состояние, повышением содержания ионов Са (термоустойчивость), появлением димиколиновой кислоты, которая подавляет метаболизм клетки.Форма спор может быть овальной и шаровидной;расположение в клетке терминальное-на конце палочки(возбудитель столбняка), субтерминальное-ближе к концу палочки(возбудитель ботулизма,газовой гангрены) и центральное(сибиреязвенна я бацилла). П методу Ожешки споры окрашиваются в красный цвет.

16 Характеристика процессов роста и размножения у бактерий. Размножение это кодированное воспроизводство клеточных компонентов и структур,ведущее к увеличению массы клеток.Схема репликации ДНК:Днк-полинуклеотид.име ет 2 цепи:информативную и комплементарную. Цепи антипараллельны и разнонаправлены. По команде одна нить уходит и прикрепляется к рядом находящейся мезосоме.Другая нить раскручивается со скоростью 10000 оборотов в минпод действием белка-

репликоида РНКполимеразы. Другая РНК-полимераза подстраивает другую нить,клетка растёт,ЦПМ растягивается и получается 2 или 4 нуклеотида.Затем происходит инвагинация с обоих сторон.ЦПМ растут и соединяются.У гр+ бактерий Кл стенка врастает внутрь.У гр-получается 2 клетки.Деление идёт за счёт 2-х нитей А иВ.А-информационная нить, В-комплементарная. Стадии размножения бактерий в жидкой пит среде.1)Lag-фаза-фаза адаптации.В этой фазе увеличения массы происходит.2)Log-фаза

логорифмического роста(при благоприятных условиях).Происходит резкое увеличение микробной массы.3)стационарная фазф.Кол-во вновь появляющихся микробов = количеству погибающих.4)Фаза отмирания.Кол-во погибающих клеток значительно больше.На 2-ой фазе микробы более чувствительны к лек препаратам.Назначают ударную дозу.Если доза недостаточна происходит хронизация процесса.Бактерицидные дозы-убивают бактерии.Бактериостатичес кие дозы преостанавливают размножение.На 4 стадии

появляются инволюционные формы: из гр+ могут перейти в гр-,изкокка в диплококк.Это затрудняет диагностику.

19 Характеристика бактериальных плазмид. Плазмиды - дополнительные кольцевые ДНК, которые несут дополнительную нежизненноважную информацию.Например R-плазмида отвечает за лекарственную зависимость.Плазмида может существовать автономно или интегрировано.Может передаваться от одной клетки к другой через конъюгативные пили- это трансмиссивные плазмиды,они имеют трансген.Нетрансмиссивные плазмиды могут передаваться с помощью фагов,реже при трансформации.К плазмидам

можно “пришить” любые гены.Их используют как вектор для передачи свойств.По свойствам выделяют:1.плазмиды,дающи е вирулентность Ent+ плазмиды отвечают за синтез ентеротоксина,Hly за синтез гемолизина,К 88 отвечает за адгезию,умеренный фаг за лизогенную конверсию.Например синтез экзотоксина у дифтерийной палочки, палочки ботулизма происходит при наличии в клетке умеренного фага,т.е.при её лизогенизации.2.Плазмиды, дающие селективные преимущества:плазмиды колициогенности (син

тез бактериями антибиотико подобных веществ.У киш палочки колицин,у стафилококка стафилоцин).Р-плазмиды отвечают за множественную лекарственную резистентность.R-плазмида трансмиссивная (самостоятельная), r-плазмида нетрансмиссивная. 3. Плазмиды,изменяющие фенотипические cвойства: изменение ферментации различных углеводов, изменение поверхностных аг. Все плазмиды имеют F+ гены, отвечающие за синтез ферментов,инактивирующх антибиотики.

26 Механизм трансформации у бактерий, эксперимент Гриффитса. Трансформация (превращение) заключа­ется в том, что ДНК, выделенная из бактерий в свободной ра­створимой форме, передается бактерии-реципиенту.. При транс­формации рекомбинация происходит, если ДНК бактерий род­ственны друг другу. В этом случае возможен обмен гомологич­ных участков собственной и проникшей извне ДНК. Клетка реципиента должна находится в компетентном состоянии –это сразу же после деления, молодая и род

ная. Донор погиб и получились фрагменты. Клетка вырабатывает ферменты , кот. Большие ращепляет на мелкие фрагменты (каталитические ферменты) и ферменты кот. Протаскивают в клетку. Двунитчатая структура попала внутрь и 3-я группа ферментов ращепляет ДНК на 1-у нить –это близкородственная клетка. Затем ферменты разрезают одну нить ее разрушают, вшивают одну нить донора в одну нить реципиента . Это происходит редко . Таким путем передаются вирулентность , появл. ферменты ращепляющих

углеводы , появляется лекарственная устойчивость. Впервые явление трансформации описал Ф. Гриффите (1928). Он вводил мышам живой невирулентный бескапсульный R-штамм пневмо­коккаиодновременно убитый вирулентный капсульный S-штамм пневмококка. Из крови погибших мышей был выделен вирулен­тный пневмококк, имеющий капсулу убитого S-штамма пнев­мококка. Таким образом, убитый S-штамм пневмококка передал наследственную способность капсулообразования R-штамму

пнев­мококка. Путем трансформации могут быть перенесены различные признаки: капсулообразование, устойчивость к антибиотикам, синтез ферментов.

1 Характеристика основных методов исследовании.Микроскопиче ский метод изучение морфологии и структуы бактерий под большим увеличением.Достоинства метода: возмож­ность изучения морфологии и структуры микробов,быстрый и недорогой метод.Применяют при острой гонореи, малярии,возвратном тифе, заболеваниях, вызываемых простейшими. Недостатки: нельзя идентифицировать род и вид микроба, невозможно обнаружить возбудителя в иссл-м материале.Например туберкул палочка мо

жет превратиться в фильт­рующую форму. Ведущий метод исследования-бактерио-лог ический. Бактериологический метод – выделение из исследуемого материала чистой культуры бактерий и её идентифика­ция.Достоинств а::возможность идентификации выделенной культуры,возможность определе­ния чувствит-ти к антиб. Недостатки: длительность, невозможность культивирования отдельных бактерий., неэкономичный метод,почвление ауксотрофов в процессе лечения.Серологический метод-выявление ан

тител или антигенов с помощью серологических реакций(р-я агглютинации,р-я преципитации,р-я связывания комплемента и др).В серологических р-ях всегда участвует сыворотка крови исследуемого человека или иммунная сыворотка( в ней всегда находятся ат).Серологические реакции строго специфичны, т.к. эпитоп аг специфичен к паратопу иммуноглобулинов за исключением реакции Вассермана.Достоинсива метода: относительная быстрота и специфичность реакции-100%гарантия диагноза.Недостатки мето

да:1.при вирусных инфекциях титр ат (т.е. их количество)будет низким, что требует высокочувствительных реакций. Р-ю ставят 2-х кратно с интервалом 7-10дней.2.при острых инфекциях данный метод пости не используются, т.к.титр ат нарастает к 5-7дню болезни.3.при некоторых инфекциях (ВИЧ) ат можно обнаружить через 3-6 мес. После зарожения и то в низком титре.Серологический метод включает серодиагностикуисероидент ификацию.Серодиагностика- выявление титра ат в сыворотке крови пациента с помо

щью известного аг.Сероидентификация-опре деление вида микроба по его аг, с помощью типоспецифических иммунных сывороток(т.е.известная сыворотка). Экспресс методы диагностики: 1. Иммунофлюоресцентный метод - сочетает быстроту микроскопического метода и специфичность серологического. 2. иммуно-ферментный анализ (ИФА). Вместо светящегося ат прикрепляется фермент.3.полимеразно-цеп ная реакция(ПЦР)-обнаружение специфических частков ДНК.

17 Строение бактериального генома.Геном бактериальной клетки составляют нуклеотид,плазмиды, транспозоны, инсайт-последовательности . Нуклеотид – жизненно-важная структура бактериальной клетки.Нуклеотид-двунитча тая ДНК, одна нить которой присоединена к мезосоме. В электронном микроскопе она видна в виде плотного стержня,не имеюсщего никаких оболочек.Помимо эл микроскопа ДНК можно обнаружить при помощи гистохимической краски и методом радиоаутографии. Эти ме

тоды показали,что ДНК имеет замкнутую кольцевую структуру.Например у E..coliдлина ДНК=1мкм.. Плазмиды - дополнительные кольцевые ДНК, которые несут дополнительную нежизненноважную информацию. Например R-плазмида отвечает за лекарственную зависимость.Плазмида может существовать автономно или интегрировано.Может передаваться от одной клетки к другой через конъюгативные пили- это трансмиссивные плазмиды,они имеют трансген.Нетрансмиссивные плазмиды могут пе

редаваться с помощью фагов,реже при трансформации.К плазмидам можно “пришить” любые гены.Их используют как вектор для передачи свойств.По свойствам выделяют:1.плазмиды,дающи е вирулентность Ent+ плазмиды отвечают за синтез ентеротоксина,Hly за синтез гемолизина,К 88 отвечает за адгезию,умеренный фаг за лизогенную конверсию.Например синтез экзотоксина у дифтерийной палочки, палочки ботулизма происходит при наличии в клетке умеренного фага,т.е.при её лизогенизации.

2.Плазмиды,дающие селективные преимущества:плазмиды колициогенности (синтез бактериями антибиотико подобных веществ.У киш палочки колицин,у стафилококка стафилоцин).Р-плазмиды отвечают за множественную лекарственную резистентность.R-плазмида трансмиссивная (самостоятельная), r-плазмида нетрансмиссивная. 3. Плазмиды, изменяющие фенотипические cвойства: изменение ферментации различных углеводов, изменение поверхностных аг. Все плазмиды имеют F+ гены, отвечающие за

синтез ферментов,инактивирующх антибиотики.Транспозоны-у часток ДНК,до 20000пар нуклеотидов с двумя плечами.Если произойдётрепликация и “врежется”какой-либо участок, напримерАГА-ТЦТ,точерез какой-то промежуток появится такой же триплет, т.е. появится лишний триплет. Insit-последо-вательности включают около 1000 нуклеотидов, не несёт никакой информации,обладает способностью передвигаться.Реплику не образуют.Как таковой генетический код не меняют, но изменяют активность гена,например

могут включать репрессивный ген.

11 Особенности строения кл стенки у разных групп бактерий. .. Кл стенка –прочная, упругая структура,придающая бактерии форму. У гр+ бактерий кл стенка толще, чем у гр-.В Кл стенке гр+ бактерий содержится небольшое кол-во полисахаридов, липидов и белков.Большую часть массы кл стенки составляет пептидогликан(муреин, мукопептид)-40 слоёв,ковалентно связанный с тейхоевыми кислотами.В Кл стенке гр- пептидогликана содержится меньше (5-10слоёв) ..Пептидогликан представлен параллельно

расположенными молекулами гликана,состоящего из остатков N-ацетилглю-козамина и N-ацетилмурамовой кислоты,соединённых гликозидной связью.Эту связь разрушает лизоцим. Гликановые молекулы связаны поперечной пептидной связью.Основу пептидной связи составляют тетрапептиды(их4-5).На поперечную связь действует пенициллин Гр+бактерии окрашиваются по Граму в синий цвет. Так как пептидогликан задерживает краску в кл стенке.У гр- бактерий меньше пептидогликана и после

воздействия спиртом они утрачивают краситель,обесцвечиваются , а после обработки фуксином окрашиваются в красный цвет.В состав Кл стенки гр- бактерий входитЦПМ,связанная посредством липопротеина с подлежащим слоем пептидогликана. Основной компонент ЦПМ-бимолеку-лярный слой липидов.ЦПМ окружает наружная мембрана,которая представлена липополисахаридами,фосфол ипидами и белками,липопротеинами и поринами. Липополисахарид состоит из липидаА,базисной части

или ядра и О-специфической цепи полисахарида,образованной повторяющимися олигосахаридными последовательностями. Липополисахарид “заякорен” в наружной мембране липидом А,придающим токсичность липополисахариду.Липид А отождествляется с эндотоксином.Олигополисах аридные последовательности определяют антигенные свойства гр- бактерий.По О-аг можно дифференцировать бактерии. Между наружной мембраной иЦПМ находится периплазма,которая содержит гидролитические фер

менты.Гидролитический фермент лизин направлен в мембрану, он лизирует сам себя и высвобождается эндотоксин.Это может привести к токсическому шоку(характерно для менингококка).Порины окаймляют гидрофильные поры. Липопротеины предают мембране жёсткость.

25 Общая характеристика механизмов рекомбинативной изменчивости убактерий.1)трансформация -передача одной нити ДНК от бактерии донора к бактерии реципиенту.Клетка погибает,содержимое,в том числе и ДНК входит и попадает к реципиенту.Впервые явления трансформации описал Гриффитс.Он вводил мышам живой невирулентный бескапсульный S-штамм пневмококка и одновременно убитый вирулентный капсульный S-штамм пневмококка.Из крови погибших мышей был выделен вирулентный

пневмококк,имеющий капсулу убитого S-штамма пневмококка. Таким образом, убитый штамм пневмококка передал наследственную способность капсулообразования R-штамму пневмококка.В 1944 году учёные доказали,что трансформирующим агентом является ДНК.ДНК путём трансформации может быть перенесена только близко родственному микробу.Клетка реципиента должна находиться в компетентном состоянии,т е должна быть молодой и родственной. Путём трансформации могут перенесены различные

признаки: капсулообразование, устойчивость к антибиотикам, синтез ферментов. 2) Трансдукция - передача фрагмента двунитчатой ДНК от донора к реципиенту с помощью мутанта умеренного фага. Вирулентные бактериофаги > репродукция > гибель бактерии (чаще). Побывав в донорской бактерии умеренный фаг становится дефективным и попадает в клетку реципиента.Разновидностью трансдукции является лизогенная конверсия. Трансдукция даёт резистентность к лек препаратам,образование капсулы.синтез фер

ментов, расщипл-их углеводы.Виды трансдукции: генерализованная (умеренный фаг встраивается в донора в любом месте хромосомы,каждый раз захватывает разные участки и свойства), специфическая(есть фаг, который всегда встраивается в строго определ. Ген.Например фаг,расщипляющий галактозу),абортивная форма(при делении лкетки фаговая ДНК передаётся только первой клетке,то есть не происходит репликации участка и теряется признак. 3) Конъюгация-передача генетической информации от донора к реци

пиенту при непосредственном контакте.Клетки контактируют если одна из них имеет F+ фактор, а другая F- фактор. Значение:передача лек зависимости с помощью R-плазмиды,передача разнообразных факторов вирулентности, изменение аг свойств и передача ферментов,расщипляющих углеводы.

3 Обязательные компоненты структуры бактериальных клеток.К обязательным стр-рам относят кл.стенку, нукеотид,ЦПМ, ,цитоплазму,мезосомыЦПМ рибосомы. Геном (нуклеотид)–двунитчатая ДНК,одна нить которой присоединена к мезосоме.В электронном микроскопе ДНК видна в виде плотного стержня, который не имеет никаких оболочек. Помимо электронного микроскопа ДНК можно обнаружить при помощи гистохимической краски и методом радиоаутографиипри помощи изотопов.Метод радио

аутографии показал, что ДНК имеет замкнутую кольцевую структуру.Например длина ДНК уЕ.coli1мкм.Цитоплазма-ко лоидная структура, в которой находится нуклеотид,включения, плазмиды и рибосомы.ЦПМ видна только в эл. микроскопе в виде двух-контурной структуры.Это билипидный слой, в котором находятся функциональные белки(ферменты),структурн ые белки, пронизывающие белки(каналы-транспортные белки).Функции ЦПМ:1.грпаница между внутренней и внешней средой.2.энергетическая

функция: окислительное фосфорилирование при помощи ферментов и накопление АТФ.3.транспортная функция.4.участие в делении клетки. Основную роль выполняют мезосомы.Мезосома это мембранное образование. Они могут быть разной формы.Различные изгибы увеличивают длинуЦПМ, а значит и количество белков-ферментов, за счёт этого повышается уровень метаболизма.Кл стенка –прочная, упругая структура,придающая бактерии форму.Она участвует в процессе деления клетки и транс

порта метаболитов.У гр+ бактерий Кл стенка толще, чем у гр-.В Кл стенке гр+ бактерий содержится небольшое кол-во полисахаридов, липидов и белков.большую часть массы кл стенки составляет пептидогликан(муреин, мукопептид),ковалентно связанный с тейхоевыми кислотами.В Кл стенке гр- пептидогликана содержится меньше. Гр+бактерии окрашиваются по Граму в синий цвет. Гр- бактерии окрашиваются в красный цвет. Функции кл стенки:1.барьерная,защитн ая функция. 2. транспортная 3.рецепторная 4. Анти

генная ( к поверхностным вещ-вам вырабатываются ат)5.адгезии.Вырабатывани е белком лектиноподобных вещ-в.6.освобождение эндотоксина 7.поддержание формы бактерий.

21 Характеристика внешних воздействий на клетку по характеру и составу..факторы среды:нормальные условия,чрезвычайные факторы,запредельны факторы.Под действием чрезвычайных факторов окружающей среды происходит изменение свойств и адаптации. Изменчивость может быть на 2-х уровнях:фенотипическая и генотипическая. Действие запредельных факторов (физ, хим, биологических и тд) приводит к гибели микроба и неспособности его к размножению.может быть летальный мутант. Измен

чивость бактерий проявляется изменением морфологических, тинктуриальных, культуральных, антигенных, вирулентных свойств (способность вызывать заболевания), резистентность к лекарственным препаратам Генотипическая изменчивость возникает под действием неинформативных и информативных факторов.Под действием неинформативных факторов: УФ, химические, биологические факторы происходят мутации.Мутация-стойкое изменение последовательности нуклеотидов под действием муто

генных факторов.Под действием информативных факторов (приходит ДНК) происходит рекомбинация.Участвуют донор и реципиент.ДНК донора переходит к реципиенту (односторонняя передача). Далее следуют процессы трансформации, трансдукции, конъюгации. Фенотипическая изменчивостьможет быть модификационной (под действием каких-либо факторов микроб меняет свои свойства:морфологию,окрас ку по Грамму, ререход в L-формы.появление индуцибильных ферментов под действиемсуб

страта), может быть представлена диссоциацией-когда один вид на разных средах образует S гладкие колонии и R-шероховатые колонии.Также фенотипическая изменчивость может выражаться в изменении аг свойств микроба под действием ат. Например у бледной спирохеты,у палочки коклюша. Формула жизни:ДНК-ДНК-РНК-белок функция = жизнь.Этап ДНК-ДНК отвечает за воспроизводство,т.е. размножение = генотипическая изменчивость.Этап РНК-белок-функция = реализация генетической информации в

замкнутой системе,рост и проявление своих свойств =фенотипическаяизменчивос ть:модификация,диссоциаци я,регуляторная изменчивость.

23 Характеристика механизма наследуемой изменчивости. Изменчивость бактерий проявляется изменением морфологических. тинктуриальных,культураль ных,антигенных ,вирулентных свойств(способность вызывать заболевания),резистентнос тью к лекарственным препаратам.Под действием чрезвычайных факторов окружающей среды происходит изменение свойств и адаптации.Изменчивость может быть на 2-х уровнях:фенотипическая и генотипическая. Наследуемая (генотипическая) изменчивость

возникает под действием неинформативных и информативных факторов.Под действием неинформативных факторов: УФ, химические, биологические факторы происходят мутации.мутация-стойкое изменение последовательности нуклеотидов под действием мутогенных факторов.под действием информативных факторов (приходит ДНК) происходит рекомбинация.Участвуют донор и реципиент.ДНК донора переходит к реципиенту(односторонняя передача).Далее следуют процессы трансформации, трансдук

ции,конъюгации. 1)трансформация-передача одной нити ДНК от бактерии донора к бактерии реципиенту. Клетка погибает, содержимое,в том числе и ДНК входит и попадает к реципиенту.Впервые явления трансформации описал Гриффитс. Путём трансформации могут перенесены различные признаки: капсулообразование, устойчивость к антибиотикам, синтез ферментов. 2) Трансдукция - передача фрагмента двунитчатой ДНК от донора к реципиенту с помощью мутанта умеренного фага.Вирулентные бактериофаги

> репродукция>гибель бактерии (чаще). Побывав в донорской бактерии умеренный фаг становится дефективным и попадает в клетку реципиента.Разновидностью трансдукции является лизогенная конверсия.Трансдукция даёт резистентность к лек препаратам,образование капсулы.синтез ферментов,расщипл-их углеводы. 3) Конъюгация-передача генетической информации от донора к реципиенту при непосредственном контакте.Клетки контактируют если одна из них имеет F+ фактор, а другая F-фактор. Значе

ние: передача лек зависимости с помощью R-плазмиды,передача разнообразных факторов вирулентности, изменение аг свойств и передача ферментов,расщипляющих углеводы.

28 Особенности строения и функционирования Hfr-клеток. Конъюгация ( соединение) бактерий состоит в переходе генети­ческого материала (ДНК) из клетки-донора (“мужской”) в клет­ку-реципиент (“женскую”) при контакте клеток между собой. Мужская клетка содержит F-фактор, которыйконтролируетсинтез половых пилей, или F-пилей. Клетки, не содержа­щие F-фактора, являются женскими; при получении F-фактораонипревращаются в “мужские” и сами становятся донорами. F-фактор располагается в

цитоплазме в виде кольцевой двунитчатой молекулы ДНК, т. е. является плазмидой. При конъюгации F-пили соединяют “мужскую” и “женскую” клетки, обеспечивая переход ДНК через конъюгационный мостик или F-пили.Клетки,содержащие F-фактор в цитоплазме, обозначаются F+; они передают F-фактор клеткам, обозначае­мым F- (“женским”), не утрачивая донорской способности, так как оставляют копии F-фактора. F+кл. обработали ипритом (отравляющий газ) и кл. стала секс-бомбой ее назвали штамм с высо

кой частотой рекомбинаций 20-30 рекомб. на 100кл.( Hfr-) Если F-фактор включается в хромосому, то бактерии приобретают способность передавать фрагменты хромосомной ДНК и называются Hfr-клетками (от англ. — высокая частота реком­бинаций), т.е. бактериями с высокой частотой рекомбинаций. Секс- бомба из автономного состояния F перешла в интегрированное F-. При конъюгации клеток Hfr и клеток F- хромосома разрывается и передается с определенного участка (начальной точки) в клет­ку F- , продол

жая реплицироваться. Перенос всей хромосомы может длиться до 100 мин. Переносимая ДНК взаимодействует с ДНК реципиента — происходит гомологичная рекомбинация. Прерывая процесс конъ­югации бактерий, можно определять последовательность распо­ложения генов в хромосоме. Иногда F-фактор может при выхо­де из хромосомы захватывать небольшую ее часть, образуя так называемый замещенный фактор — F'. При конъюгации происходит только частичный перенос ге­нетического материала, поэтому ее

не следует отождествлять пол­ностью с половым процессом у других организмов.

30 Роль механизмов изменчивости в эволюции бактерий. Виды изменчивости : фенотипические и генотипические. Фенотипические могут быть 1) модификационные ( это микроб временно теряет свои морфологические св-ва, окраску по грамму, перейти в L –форму, диссоциация-когда один вид образует R или S колонии; 2) регуляторная форма ( под действием наших АТ меняются АГ св-ва микроба) . Генотипические (ДНК) могут быть : 1) под действием неинформативных факторов (УФО, б/хим,биолог) , мутация ; 2)

под действием информативных факторов (рекомбинативная изменчивость-виды трансформация , трансдукция, коньюгация). Изменчивость бактерий-изменение свойств: 1) морфологические (был кокк стал неизвестно) ; 2) тинкториальные св-ва ( способность по разному окрашиваться гр+ стал гр-); 3) культуральные –растет на одной среде потом на другой; 4) антигенные св-ва ( АТ не действуют); 5) вирулентные св-ва; 6) резистентность ( устойчивость к лекарств. пр-том ). Изменив свои св-ва микроб дальше размножа

ется. Мутация-изменение генетического кода, стойкое изменение последовательности нуклеотида. Могут образоватся жизнеспособные и летальные мутанты. У бак. мутация это чаще потеря признака и поэтому возможно в эволюции бак. Мутации не играют ведущей роли. Изменения свойств кот. вызыв. Мутация: 1) потеря св-в синтезировать белки; 2) потеря синтезировать а/к –ауксотроф; 3) потеря способности ферментации некот. Углеводов; 4) потеря способности к рекомбинации; 5) потеря способности к вирулентности;

6) изменение АГ свойств; 7) появляется устойчивость к лекарст. препаратам и к температуре. Рекомбинативная изменчивость: 1) при трансформации а) передаётся вирулентность; б) появление ферментов ращепляющие углеводы; в) появл. лекарст. Устойчивость ; 2) при трансдукции а) резистентность к лекарст. препаратам ; б) образование капсулы; в) синтез ферментов ращепляющие углеводы; 3) при коньюгации а) лекарственная резистентность при помощи R-плазмид; б) разныефакторывирулентност и(св-во токсины) ;

в) ферменты ращепляющие углеводы; г) АГ –ые св-ва.

7 Особенности механизма питания у бактерий. По типу питания бактерии разделяют на аутотрофы гетеротрофы.ауксотрофы могут из неорганических соединений синиезировать органические с затратой энергии. Это микробы,которые участвуют в круговороте C,О2,N и находятся вокруг нас.Они получают энергию за счёт фотосинтеза.Азот-нитрирую щие бактерии используют химическую реакцию(хемотрофы).Эти бактерии не патогенны для людей и животных. Гетеротрофы не могут синтезировать органические

соединения и нуждаются в готовом органическом субстрате.К гетеротрофам относятся: паратрофы,метатрофы(нужда ются в мёртвом органическом субстрате),абсолютные паразиты (вирусы,риккетсии,хламиди и)и ауксотрофы.Ауксотрофы нужлаются в определённых веществах, которые сами синтезировать не могут.Например гонококк не вырастет на питательной среде из глюкозы и солей аммония, если в неё не добавить человеческий белок. Особенности механизма питания у бактерий .Кл стенка и ЦПМ не могут пропускать

большие молекулы.Для их расщипления бактерия выделяет наружу экзоферменты. Экзоферменты расщипляют макромолекулу на микромолекулы.У бакт.клетки на поверхности есть рецепторы,которые улавливают нужное вещество и ферменты пермиазы протаскивают это вещество в ЦПМ.Внутри клетки работают транслоказы.У гр+ бактерий роль рецептороф выполняют тейхоевые кислоты, у гр- порины,у микоплазмы белковые ферменты ЦПМ.Питательные вещества могут поступать в клетку без затрат энер

гии(простая и облегчённая диффузия) и с затратой энергии(активный перенос против градиента концентрации, фосфорилирование).Схема поступления пит веществ на примере гр+микроба:наружу выходят экзоферменты по каналам их тейхоевых кислот. Полисахарид превращается в моносахара. Глюкоза через тейхоевы кислоты проходит через ЦПМ.Её тащит транслоказа.Глюкоза идёт либо на биосинтез(питание), либо на катаболизм (дыхание).

9 Структуры и механизмы,обеспечивающие поступление пит веществ в бактериальную клетку. По типу питания бактерии разделяют на аутотрофы гетеротрофы.ауксотрофы могут из неорганических соединений синиезировать органические с затратой энергии. Это микробы,которые участвуют в круговороте C,О2,N и находятся вокруг нас.Они получают энергию за счёт фотосинтеза.Азот-нитрирую щие бактерии используют химическую реакцию(хемотрофы).Эти бактерии не патогенны

для людей и животных.Гетеротрофы не могут синтезировать органические соединения и нуждаются в готовом органическом субстрате.К гетеротрофамотносятся:пар атрофы,метатрофы(нуждаютс я в мёртвом органическом субстрате),абсолютные паразиты (вирусы,риккетсии,хламиди и)и ауксотрофы.Ауксотрофы нужлаются в определённых веществах, которые сами синтезировать не могут.Например гонококк не выпастет на питательной среде из глюкозы и солей аммония, если в неё не добавить человеческий белок.

Особенности механизма питания у бактерий .Кл стенка и ЦПМ не могут пропускать большие молекулы.Для их расщипления бактерия выделяет наружу экзоферменты.Экзоферменты расщипляют макромолекулу на микромолекулы.У бакт.клетки на поверхности есть рецепторы,которые улавливают нужное вещество и ферменты пермиазы протаскивают это вещество в ЦПМ.Внутри клетки работают транслоказы.У гр+ бактерий роль рецептороф выполняют тейхоевые кислоты, у гр- порины,у ми

коплазмы белковые ферменты ЦПМ.Питательные вещества могут поступать в клетку без затрат энергии(простая и облегчённая диффузия) и с затратой энергии(активный перенос против градиента концентрации, фосфорилирование).Схема поступления пит веществ на примере гр+микроба:наружу выходят экзоферменты по каналам их тейхоевых кислот.Полисахарид превращается в моносахара.Глюкоза через тейхоевы кислоты проходит через ЦПМ.Её тащит транслока

за.Глюкоза идёт либо на биосинтез(питание), либо на катаболизм (дыхание)

20 Характеристика основных форм изменчивости бактерий.Изменчивость бактерий проявляется изменением морфологических.тинктуриа льных,культуральных,антиг енных ,вирулентных свойств(способность вызывать заболевания),резистентнос ть к лекарственным препаратам.Под действием чрезвычайных факторов окружающей среды происходит изменение свойств и адаптации.Изменчивость может быть на 2-х уровнях:фенотипическая и генотипическая. Генотипическая изменчивость возникает под дей

ствием неинформативных и информативных факторов.Под действием неинформативных факторов: УФ, химические, биологические факторы происходят мутации.мутация-стойкое изменение последовательности нуклеотидов под действием мутогенных факторов.под действием информативных факторов (приходит ДНК) происходит рекомбинация.Участвуют донор и реципиент.ДНК донора переходит к реципиенту(односторонняя передача).Далее следуют процессы трансформации, трансдукции, конъюгации. Фено

типическая изменчивостьможет быть модификационной (под действием каких-либо факторов микроб меняет свои свойства:морфологию,окрас ку по Грамму,ререход в L-формы.появление индуцибильных ферментов под действиемсубстрата), может быть представлена диссоциацией-когда один вид на разных средах образует S гладкие колонии и R-шероховатые колонии.Также фенотипическая изменчивость может выражаться в изменении аг свойств микроба под действием ат. Например у бледной спирохеты,у палочки

коклюша. Формула жизни:ДНК-ДНК-РНК-белок-ф ункция=жизнь. Этап ДНК - ДНК отвечает за воспроизводство, т.е. размножение = генотипическая изменчивость.Этап РНК-белок-функция=реализа ция генетической информации в замкнутой системе,рост и проявление своих свойств =фенотипическая изменчивость: модификация, диссоциация, регуляторная изменчивость.

29 Особенности строения и функционирования F`- клеток. Конъюгация ( соединение) бактерий состоит в переходе генети­ческого материала (ДНК) из клетки-донора (“мужской”) в клет­ку-реципиент (“женскую”) при контакте клеток между собой. Мужская клетка содержит F-фактор, которыйконтролируетсинтез половых пилей, или F-пилей. Клетки, не содержа­щие F-фактора, являются женскими; при получении F-фактораонипревращаются в “мужские” и сами становятся донорами. F-фактор располагается в цито

плазме в виде кольцевой двунитчатой молекулы ДНК, т. е. является плазмидой. При конъюгации F-пили соединяют “мужскую” и “женскую” клетки, обеспечивая переход ДНК через конъюгационный мостик или F-пили.Клетки,содержащие F-фактор в цитоплазме, обозначаются F+; они передают F-фактор клеткам, обозначае­мым F- (“женским”), не утрачивая донорской способности, так как оставляют копии F-фактора. F+кл. обработали ипритом (отравляющий газ) и кл. стала секс-бомбой ее назвали штамм с высо

кой частотой рекомбинаций 20-30 рекомб. на 100кл.( Hfr-) Секс- бомба из автономного состояния F перешла в интегрированное F-. При конъюгации клеток Hfr и клеток F- хромосома разрывается и передается с определенного участка (начальной точки) в клет­ку F- , продолжая реплицироваться.Переносвс ей хромосомы может длиться до 100 мин. Переносимая ДНК взаимодействует с ДНК реципиента — происходит гомологичная рекомбинация. Прерывая процесс конъ­югации бактерий, можно определять последователь

ность распо­ложения генов в хромосоме. Иногда F-фактор может при выхо­де из хромосомы захватывать небольшую ее часть, образуя так называемый замещенный фактор — F'. При конъюгации происходит только частичный перенос ге­нетического материала, поэтому ее не следует отождествлять пол­ностью с половым процессом у других организмов.

2 Принципы классификации бактерий. По морфологии (по форме)выделяют: 1кокки-микрококки, диплококки, гонококки, пневмококки, тетракокки, стрептококки, сарцина (форма кубика), стафилококк(гроздь винограда).2.палочки спорообразующие и неспорообразующие.К спорообразующим палочкам относят аэробные бациллы с маленькой спорой,например у сибирской язвы и клостридии с большой спорой.Клостридии являются анаэробами(столбнячная, палочка ботулизма).К неспорообразующим палочкам

относят дифтерийную и кишечнуюпалочки.3.Извитые формы:холерный вибрион, спирелла, спирохеты (трипонема- бледная спирохета, боррелия-возвратный тиф, лептоспиры).По наличию клеточной стенки бактерии можно разделить на 3 группы:гр+,гр-и микоплазмы.Гр+бактерии окрашиваются по Граму в синий цвет.К ним относят: микрококки,пневмококки, сарцина, тетракокк, стрептококки, спорообразующие бациллы и клостридии(кроме дифтерийной и туберкул палочек,актиномицет, лактобактерий.Гр- бак

терии окрашиваются в красный цвет.К ним относятгонококки,менингок окки-нейсерии, неспорообразующие палочки:Е.coliи сальмонелла,извитые формы:спирохеты и спиреллы.Микоплазмы не имеют клеточной стенки.Выделяют ещё L-формы.Это бактерии,к-ые временно потеряли кл.стенку под действием пенициллина-возникает хронизация инфекционного процесса.

5 Сравнительная характеристика строения клеток про и эукариотов. Одноклеточные эукариоты имеют ядро, диплоидный набор хромосом.Деление у эукариотов представлено митозом и мейозом.Эукариоты имеют много мембранных образований.не имеют пептидогликана в клеточной стенке.Имеют 80 S рибосомы.Питание осуществляют путём внутриклеточного переваривания(фагоцитоз, пиноцитоз).Прокариоты не имеют ядра, но у них есть ядерное вещество.Они имеют гаплоидный набор хромо

сом.Деление у них простое(из 1кл получаются. Из мембранных образований есть только ЦПМ.В клетлчной стенке находится пептидогликан, наличие которого обусловливает способность бактерий окрашиваться по Граму. Гр+бактерии окрашиваются по Граму в синий цвет.К ним относят: микрококки, пневмококки, сарцина, тетракокк, стрептококки, спорообразующие бациллы и клостридии(кроме дифтерийной и туберкул палочек,актиномицет, лактобактерий.Гр- бактерии окрашиваются в красный цвет.К ним от

носят гонококки,менингококки-не йсерии, неспорообразующие палочки:Е.coliи сальмонелла,извитые формы:спирохеты и спиреллы.Для прокариот характерно спорообразование.Это обеспечивает сохранение вида в неблагоприятных условиях. 1палочка образует 1 спору.Прокариоты имеют 70S рибосомы.Для прокариот характерно внеклеточное питание,т.е прокариоты расщипляют питательные вещества на своей поверхности. Бактерии относятся к прокариотам.

24 Определение понятия мутация.механизм мутаций у бактерий. Мутация - стойкое изменение последовательности нуклеотидов под действием патогенныхфакторов.Индуци рованная мутация- мутация, причины которой известны (радиация, УФ, биологические факторы, вирусы и тд).В результате мутации могут образовываться жизнеспособные и летальные мутанты. Механизмы мутации. Чаще у бактерий возникают точечные мутации:1)пурин меняется на пимидин и наоборот 2)происходит вышибание

пары 3)происходит удвоение пары. Хромосомные мутации встречаются редко. У бактерий мутация это чаще потеря признака и поэтому возможно в эволюции бактерий мутации не играют ведущей роли.Мутации вызывают следующие изменения свойств:1)потеря возможности синтезировать а/к.Был пронатор,стал ауксотроф.2)потеря способности ферментации некоторых углеводов 3)потеря способности к рекомбинации 4)снижение или потеря вирулентности.5)изменение аг свойств 6) появление устойчивости к лек.

препаратам и устойчивости к температурным факторам.Практическое использование мутаций:получение живых ослабленных микробов для вакциации; получение мутантов,например гриба пенициллиума для синтеза пенициллина;использование в биотехнологии ферментации нефтяных отходов; изучение мутогенного действия лекарств на микробы.

22 Характеристика механизма ненаследуемой изменчивости у бактерий. Изменчивость бактерий проявляется изменением морфологических, тинктуриальных, культуральных, антигенных, вирулентных свойств (способность вызывать заболевания), резистентностью к лекарственным препаратам. Под действием чрезвычайных факторов окружающей среды происходит изменение свойств и адаптации. Изменчивость может быть на 2-х уровнях:фенотипическая и генотипическаяНенаследств енная изменчивость

обусловлена влиянием внутри- и внеклеточных факторов на проявление генотипа.При устранении фактора,вызвавшего модификацию, данные изменения исчезают. Фенотипическая изменчивостьможет быть модификационной (под действием каких-либо факторов микроб меняет свои свойства:морфологию,окрас ку по Граму,переход в L-формы,появление индуцибильных ферментов под действиемсубстрата), может быть представлена диссоциацией-когда один вид на разных средах образует S гладкие колонии

и R-шероховатые колонии.Также фенотипическая изменчивость может выражаться в изменении аг свойств микроба под действием ат. Например у бледной спирохеты,у палочки коклюша

18 Механизм репликации хромосомной ДНК у бактерий..Схема репликации ДНК:Днк-полинуклеотид имеет 2 цепи:информативную и комплементарную.Цепи антипараллельны и разнонаправлены.По команде одна нить уходит и прикрепляется к рядом находящейся мезосоме.Другая нить раскручивается со скоростью 10000 оборотов в минпод действием белка-репликоида РНКполимеразы, образуется репликационная вилка.Одна цепь достраиваясь,связывает нуклеотиды от 5 штрих к 3

штрих концу.Другая РНКполимераза подстраивает другую нить посегментарно.Репликация ДНК происходит в 3 этапа:инициация,элонгация или рост цепи, и терминация.Клетка растёт,ЦПМ растягивается и получается 2 или 4 нуклеотида.Затем происходит инвагинация с обоих сторон.ЦПМ растут и соединяются.У гр+ бактерий кл стенка врастает внутрь.У гр-получается 2 клетки.Деление идёт за счёт 2-х нитей А иВ.А-информационная нить,В-комплементарная.

10 Характеристика структур, определяющих форму бактерий. Кл стенка –прочная, упругая структура,придающая бактерии форму.У гр+ бактерий кл стенка толще, чем у гр-.В Кл стенке гр+ бактерий содержится небольшое кол-во полисахаридов, липидов и белков.Большую часть массы кл стенки составляет пептидогликан (муреин, мукопептид), ковалентно связанный с тейхоевыми кислотами.В Кл стенке гр- пептидогликана содержится меньше. Гр+бактерии окраши

ваются по Граму в синий цвет. Гр- бактерии окрашиваются в красный цвет.Функции кл стенки: 1.барьерная,защитная функция. 2. транспортная 3. рецепторная 4. Антигенная (к поверхностным вещ-вам вырабатываются ат) 5.адгезии.Вырабатывание белком лектиноподобных вещ-в.6.освобождение эндотоксина 7.поддержание формы бактерий.

БАКТЕРИИ 1

1 Характеристика основных методов исследовании

2 Принципы классификации бактерий

3 Обязательные компоненты структуры бактериальных клеток

4 Не обязательные компоненты структуры бактериальных клеток

5 Сравнительная характеристика строения клеток про и эукариотов

6 Особенности структуры L-форм, микоплазм, хламидий, спирохет

7 Особенности механизма питания у бактерий

8 Особенности энергетического метаболизма у разных групп бактерий

9 Структуры и механизмы,обеспечивающие поступление пит веществ в бактериальную клетку

10 Характеристика структур, определяющих форму бактерий

11 Особенности строения кл стенки у разных групп бактерий

12 Механизм образования и строения спор у бактерий

13 Строение и функционирование органов движения у бактерий

14 Особенности строения и функционирования ЦПМ у бактерий

15 Отличия живой системы от неживой. Определение и формула жизни

16 Характеристика процессов роста и размножения у бактерий

17 Строение бактериального генома

18 Механизм репликации хромосомной ДНК у бактерий

19 Характеристика бактериальных плазмид

20 Характеристика основных форм изменчивости бактерий

21 Характеристика внешних воздействий на клетку по характеру и составу

22 Характеристика механизма ненаследуемой изменчивости у бактерий

23 Характеристика механизма наследуемой изменчивости

24 Определение понятия мутация. Механизм мутаций у бактерий

25 Общая характеристика механизмов рекомбинативной изменчивости у бактерий

26 Механизм трансформации у бактерий, эксперимент Гриффитса

27 Коньюгация у бактерий , F+ и F- клетки

28 Особенности строения и функционирования Hfr-клеток

29 Особенности строения и функционирования F`- клеток

30 Роль механизмов изменчивости в эволюции бактерий

13 Строение и функционирование органов движения у бактерий.К органам движения у бактерий относятся жгутики и пили. Жгутики-тонкие нити, берущие начало от ЦПМ;длина их больше,чем длина клетки. Жгутики состоят из белка флагелина. Подвижность определяют в живом состоянии в тёмном поле зрения,но самих жгутиков не видно.. Они обладают антигенными сва-вами.Жгутики можно увидеть в эл микроскопе,при специальном окрашивании(серебрение,св ечение).Число жгутиков

варьирует от одного(монотрих) до сотен(перитрих).Лофотрихи имеют пучок жгутиков на одном конце клеетки, амфитрихи по одному жгутику или пучку на противоположных концах клетки.Пили-тончайшие нити,видны в эл.микроскопе.Функции пилей:адгезия, участие в питании и участие в конъюгации. Конъюгативные пили (их 1-4)передают плазмиды.

15 Отличия живой системы от неживой. Определение и формула жизни. Жизнь, одна из форм существования материи,закономерно возникающая при определённых условиях в процессе её развития.Организмы отличаются от неживых объектов обменов веществ, раздражимостью,способност ью к размножению, росту, развитию, активной регуляцией своего состава ифункций, к разл.формам движения, приспособляемостью к среде и т.п.ДНК-ДНК-РНК-белок-фун кция=жизнь.Этап ДНК-ДНК

отвечает за воспроизводство, т.е. размножение = генотипическая изменчивость. Этап РНК-белок-функция=реализа ция генетической информации в замкнутой системе,рост и проявление своих свойств =фенотипическая изменчивость: модификация, диссоциация, регуляторная изменчивость.

14 Особенности строения и функционирования ЦПМ у бактерий. ЦПМ видна только в эл. микроскопе в виде двух-контурной структуры.Это билипидный слой, в котором находятся функциональные белки (ферменты), структурные белки,пронизывающие белки(каналы-транспортные белки).Функции ЦПМ:1.грпаница между внутренней и внешней средой.2.энергетическая функция: окислительное фосфорилирование при помощи ферментов и накопление АТФ. 3. транспортная функция.4.участие в делении клетки. Ос

новную роль выполняют мезосомы. Мезосома это мембранное образование. Они могут быть разной формы.Различные изгибы увеличивают длину ЦПМ, а значит и количество белков-ферментов, за счёт этого повышается уровень метаболизма.

Скачать полную версию шпаргалки [87,8 Кб]   Информация о работе
Источник: http://studentmedic.ru/shpory.php?view=73



Рекомендуем посмотреть ещё:



Похожие новости


Что сажать после ржи
Ваза белая цветок фарфор
Обои в оранжевый цветок
Все семена цветов гавриш каталог
Цена теплиц в саранске
Варикоз лечение каланхоэ
Когда сажают севок на репку


Хламидии посев с чувствительностью к антибиотикам Хламидии посев с чувствительностью к антибиотикам Хламидии посев с чувствительностью к антибиотикам
Хламидии посев с чувствительностью к антибиотикам


Хламидиоз, хламидии: симптомы, лечение женщин, мужчин
Здоровье. Медицинский центр. Северодвинск Лабораторные




ШОКИРУЮЩИЕ НОВОСТИ